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长春花再生体系的建立及g10h、dat基因遗传转化的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 文献综述第12-34页
   ·植物次生代谢产物第12-13页
   ·长春花萜类吲哚生物碱概述第13-14页
   ·长春花TIAs 生物合成途径第14-16页
   ·长春花TIAs 代谢调控的研究第16-23页
     ·长春花TIAs 生物合成途径中的酶及基因的表达与调控第16-21页
     ·影响长春花TIAs 生物合成的因素第21-23页
   ·应用生物技术生产长春花TIAs第23-31页
     ·细胞与组织培养第24-25页
     ·通过遗传转化工程生产TIAs第25-31页
   ·结论和展望第31-32页
   ·本研究的目的和意义第32-34页
第二章 长春花再生体系的建立第34-50页
   ·引言第34-35页
   ·材料与试剂第35-36页
     ·植物材料第35页
     ·常用试剂及培养基的制备第35-36页
   ·方法第36-39页
     ·长春花无菌苗下胚轴的获得第36页
     ·愈伤组织的诱导第36-37页
     ·胚性愈伤组织的诱导和增殖培养第37页
     ·体细胞胚萌发和分化成苗第37-38页
     ·组织学观察第38-39页
     ·实验设计和数据分析第39页
   ·结果第39-48页
     ·愈伤组织的诱导第39-41页
     ·胚性愈伤组织的诱导和增殖培养第41-42页
     ·体细胞胚萌发和分化成苗第42-44页
     ·形态学和组织学的特征第44-47页
     ·水解酪蛋白和L-脯氨酸对体细胞胚发生的影响第47-48页
   ·讨论第48-50页
第三章 长春花g10h、dat 基因遗传转化的研究第50-87页
   ·引言第50页
   ·材料与试剂第50-53页
     ·植物材料第50页
     ·菌株第50-51页
     ·常用质粒载体第51页
     ·酶与试剂盒第51页
     ·常用试剂第51-52页
     ·常用试剂及培养基的制备第52-53页
   ·方法第53-73页
     ·长春花无菌苗的培养第53页
     ·长春花TIAs 生物合成关键酶基因的克隆第53-59页
     ·植物表达载体的构建第59-66页
     ·植物表达载体转化根癌农杆菌EHA105第66-67页
     ·长春花遗传转化方法第67-68页
     ·转基因长春花的PCR 检测第68-70页
     ·荧光定量PCR 检测转基因长春花g10h、dat 基因的表达第70-73页
   ·结果第73-85页
     ·TIAs 生物合成途径中关键基因g10h、dat 的克隆第73页
     ·植物表达载体的构建第73-75页
     ·长春花的遗传转化及再生第75-76页
     ·转基因长春花的PCR 检测第76-78页
     ·荧光定量PCR 检测转基因长春花g10h、dat 基因的表达第78-85页
   ·讨论第85-87页
参考文献第87-100页
致谢第100-101页
攻读学位期间发表的学术论文目录第101-103页

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