| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-17页 |
| ·肿瘤新生血管生成抑制剂简介 | 第10-11页 |
| ·EMAP Ⅱ及pro-EMAP Ⅱ | 第11-14页 |
| ·血管生成模型研究 | 第14-15页 |
| ·细胞因子MCP-1及IL8 | 第15-17页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第17-33页 |
| ·材料 | 第17-22页 |
| ·质粒、菌株及细胞系 | 第17页 |
| ·主要分子生物学试剂及耗材 | 第17-22页 |
| ·方法 | 第22-33页 |
| ·DNA片段的PCR扩增 | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物及目的条带回收 | 第22-23页 |
| ·目的基因连接T载体 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第24-25页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·目的蛋白表达形式分析 | 第26页 |
| ·目的蛋白的Histrap FF柱亲和层析 | 第26-28页 |
| ·目的蛋白的SP柱离子交换层析 | 第28页 |
| ·G-25凝胶过滤柱除盐 | 第28页 |
| ·透析除盐 | 第28页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第28-29页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·管腔形成实验 | 第29页 |
| ·细胞迁移实验 | 第29-30页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第30页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第30-31页 |
| ·Real-time PCR | 第31-32页 |
| ·双夹心ELISA检测细胞因子活性 | 第32-33页 |
| 第3章 p43N的生物学活性研究 | 第33-48页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-44页 |
| ·引物设计及目的基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·表达载体pTIG-Trx/N/C的构建 | 第34-35页 |
| ·p43N及p43C的表达和纯化 | 第35-41页 |
| ·p43N及p43C的生物学活性分析 | 第41-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 p43N对血管内皮细胞相关基因转录水平的调控 | 第48-57页 |
| ·引言 | 第48-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·样品的制备及总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·Real-time PCR检测内皮细胞相关基因转录水平的差异 | 第52-55页 |
| ·结论 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第5章 总结 | 第57-58页 |
| ·本研究主要获得的结果 | 第57页 |
| ·本研究的创新之处 | 第57页 |
| ·需进一步解决的问题 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63-64页 |