| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 主要縮写符号说明 | 第14-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-31页 |
| ·植物二萜和酶的研究概况 | 第18-28页 |
| ·本实验研究的目的、意义及技术路线 | 第28-31页 |
| 第二章 丹参对映柯巴基焦磷酸和酶(ent-CPS)基因cDNA全长克隆及分析 | 第31-50页 |
| ·SMARTer RACE cDNA实验原理 | 第31-32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·丹参毛状根中RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·6-7V培养基的配制 | 第33页 |
| ·丹参毛状根的预培养 | 第33页 |
| ·丹参毛状根的继代培养 | 第33-34页 |
| ·RNA的提取 | 第34页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第34-37页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·实验步骤 | 第35-37页 |
| ·cDNA末端快速扩增(RACE) | 第37-39页 |
| ·实验试剂 | 第37页 |
| ·实验步骤 | 第37-39页 |
| ·PCR扩增片段的回收 | 第39-41页 |
| ·实验试剂 | 第39-40页 |
| ·实验步骤 | 第40-41页 |
| ·T-A连接、转化、蓝/白菌落筛选及阳性克隆PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·实验材料与试剂 | 第41页 |
| ·操作步骤 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-50页 |
| ·丹参总RNA提取结果 | 第42-43页 |
| ·5`RACE扩增结果 | 第43-44页 |
| ·3`RACE扩增结果 | 第44页 |
| ·en t-CPS全长基因生物信息学分析 | 第44-50页 |
| 第三章 SmCPS和ent-CPS基因的RNA干扰载体的构建及转化 | 第50-63页 |
| ·SmCPS和ent-CPS基因干扰载体的构建 | 第52-59页 |
| ·Gateway载体构建方法中BP反应 | 第52-56页 |
| ·Gateway载体构建方法中LR反应 | 第56-57页 |
| ·载体构建实验结果 | 第57-59页 |
| ·农杆菌介导SmCPS和ent-CPS基因的转化 | 第59-63页 |
| ·双元载体转化农杆菌ACC10060 | 第59-61页 |
| ·农杆菌的活化扩增 | 第61页 |
| ·浸染及共培养 | 第61-62页 |
| ·选择培养 | 第62页 |
| ·筛选鉴定 | 第62-63页 |
| 第四章 外源性诱导子对SmCPS基因的表达及丹参酮类化合物积累的影响 | 第63-74页 |
| ·丹参毛状根的培养及诱导子处理 | 第64-65页 |
| ·诱导子对SmCPS基因表达的影响 | 第65-70页 |
| ·RNA的提取(Trizol法) | 第65-66页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第66-67页 |
| ·SmCPS的实时定量表达结果 | 第67-70页 |
| ·诱导子对毛状根中丹参酮类化合物含量的影响 | 第70-73页 |
| ·HPLC检测丹参毛状根中丹参酮类含量 | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-73页 |
| ·小结与讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 结果与展望 | 第74-77页 |
| ·本实验的主要研究结果和结论 | 第74-75页 |
| ·ent-CPS全长基因的克隆 | 第74页 |
| ·CPS基因家族干扰载体的构建 | 第74-75页 |
| ·外源诱导子对SmCPS基因的表达及丹参酮类化合物的影响 | 第75页 |
| ·结语与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附录1 | 第87-102页 |
| 附录2 | 第102页 |
