摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一部分 前言 | 第13-34页 |
1.NTM的分布及危害 | 第13-14页 |
2.NTM生物学特性 | 第14页 |
3.NTM致病性特点 | 第14-16页 |
4.动物中NTM的流行情况 | 第16-17页 |
5.NTM研究进展 | 第17-18页 |
6.NTM的分离培养方法 | 第18-22页 |
·按培养基的性状分类 | 第18-19页 |
·按成分分类 | 第19-20页 |
·以琼脂为基础培养基 | 第20-21页 |
·按目的分类 | 第21-22页 |
7.NTM的鉴别分类研究 | 第22-23页 |
8.NTM分类方法 | 第23-27页 |
·生长特性鉴定 | 第23页 |
·生化试验鉴定 | 第23-25页 |
·鉴别培养基生长试验鉴定 | 第25页 |
·分子生物学方法 | 第25-27页 |
9.NTM的血清学研究 | 第27-28页 |
10.基因组文库技术的应用 | 第28-29页 |
11.NTM的诊断与防治 | 第29-32页 |
·诊断标准 | 第29-30页 |
·NTM病的治疗 | 第30页 |
·NTM的防治 | 第30-32页 |
12.本实验的目的和意义 | 第32-34页 |
第二部分 实验内容 | 第34-79页 |
实验一 猪、牛非结核分枝杆菌的分离与鉴定研究 | 第34-50页 |
1.引言 | 第34页 |
2.材料和方法 | 第34-40页 |
·材料 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-40页 |
3.结果 | 第40-46页 |
·细菌分离培养结果 | 第40-41页 |
·菌型鉴定结果 | 第41-45页 |
·综合菌型鉴定结果 | 第45-46页 |
4.讨论 | 第46-49页 |
·NTM检验没有金标准 | 第46页 |
·综合结果的确定 | 第46-47页 |
·NTM牛群中最新流行情况 | 第47页 |
·NTM猪群中流行情况比较分析 | 第47页 |
·牛群、猪群NTM分离率比较 | 第47-48页 |
·实验中牛结核杆菌的分离情况 | 第48页 |
·NTM的危害及防治重点 | 第48页 |
·实验创新及研究展望 | 第48-49页 |
5.小结 | 第49-50页 |
实验二 猪、牛非结核分枝杆菌的血清学鉴定研究 | 第50-59页 |
1.引言 | 第50页 |
2.材料和方法 | 第50-53页 |
·材料 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-53页 |
3.结果 | 第53-56页 |
·NTM菌体抗原的制备 | 第53页 |
·凝集反应实验结果 | 第53-56页 |
·凝集素吸收实验结果 | 第56页 |
4.讨论 | 第56-58页 |
·免疫方法的建立 | 第56页 |
·交叉凝集反应 | 第56-57页 |
·凝集素吸收实验 | 第57页 |
·血清学分型实验与实验一分类实验结果对比分析 | 第57-58页 |
·排除非特异性交叉凝集反应 | 第58页 |
·NTM血清型分布的环境因素 | 第58页 |
5.小结 | 第58-59页 |
实验三 非结核分枝杆菌基因组文库的构建及保存 | 第59-72页 |
1.引言 | 第59页 |
2.材料和方法 | 第59-65页 |
·材料 | 第59-60页 |
·方法 | 第60-65页 |
3.结果 | 第65-69页 |
·载体质粒制备结果 | 第65页 |
·载体酶切去磷酸化结果 | 第65-66页 |
·核酸提取结果 | 第66-67页 |
·基因组DNA酶切最佳条件摸索实验 | 第67页 |
·基因组DNA酶切实验结果 | 第67-68页 |
·连接转化后蓝白斑筛选情况 | 第68-69页 |
·阳性克隆的结果 | 第69页 |
·基因组文库的构建 | 第69页 |
4.讨论 | 第69-71页 |
·偶发分枝杆菌的选择 | 第69页 |
·基因组DNA的提取 | 第69-70页 |
·基因组DNA酶切片段的回收 | 第70页 |
·线性载体与外源DNA的连接 | 第70页 |
·阳性克隆的筛选 | 第70页 |
·基因组文库的保存 | 第70页 |
·基因组文库的意义及发展 | 第70-71页 |
5.小结 | 第71-72页 |
实验四 偶发分枝杆菌基因组文库中Hsp65基因序列分析 | 第72-79页 |
1.引言 | 第72页 |
2.材料和方法 | 第72-74页 |
·材料 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-74页 |
3、结果 | 第74-77页 |
·Hsp65基因的扩增结果 | 第74页 |
·Hsp65基因PCR产物纯化回收结果 | 第74-75页 |
·Hsp65核苷酸序列测定结果和比较结果 | 第75-76页 |
·氨基酸序列分析 | 第76页 |
·遗传进化分析 | 第76-77页 |
4.讨论 | 第77-78页 |
·基因组文库的应用 | 第77页 |
·核苷酸序列比较 | 第77页 |
·氨基酸序列分析 | 第77-78页 |
·进化树分析 | 第78页 |
5.小结 | 第78-79页 |
结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
附录 | 第90-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简介 | 第97页 |