| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·蜘蛛丝的性质与相关研究 | 第9-12页 |
| ·蜘蛛丝的种类与性能 | 第9页 |
| ·蜘蛛拖丝蛋白及基因结构 | 第9-11页 |
| ·蜘蛛丝的研究与应用 | 第11-12页 |
| ·毛发角蛋白 | 第12-13页 |
| ·角蛋白的分类与组成 | 第12页 |
| ·角蛋白的结构 | 第12页 |
| ·超高硫角蛋白的特性 | 第12-13页 |
| ·启动子与报告基因 | 第13-14页 |
| ·启动子的结构与克隆 | 第13页 |
| ·报告基因 | 第13-14页 |
| ·颗粒细胞 | 第14-15页 |
| ·颗粒细胞的特点 | 第14-15页 |
| ·颗粒细胞的研究 | 第15页 |
| ·成纤维细胞 | 第15-16页 |
| ·成纤维细胞特点 | 第15页 |
| ·成纤维细胞的研究 | 第15-16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 真核表达载体的构建 | 第17-27页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·实验菌株 | 第17页 |
| ·载体信息 | 第17页 |
| ·实验载体 | 第17-18页 |
| ·仪器设备 | 第18页 |
| ·实验药品配制 | 第18-19页 |
| ·主要试剂配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·CMV-2S-pIRES-EGFP拖丝蛋白真核表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·UHS-2S-pIRES-EGFP拖丝蛋白真核表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·实验结果 | 第22-25页 |
| ·CMV-2S-IRES-GFP拖丝蛋白真核表达载体的鉴定 | 第22-23页 |
| ·UHS-2S-IRES-GFP拖丝蛋白真核表达载体的鉴定 | 第23-25页 |
| ·讨论 | 第25页 |
| ·本章小结 | 第25-27页 |
| 3 小鼠卵巢颗粒细胞的转染、筛选与鉴定 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·实验载体 | 第27页 |
| ·实验药品 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·小鼠颗粒细胞的采集与原代培养 | 第28-29页 |
| ·小鼠颗粒细胞的传代培养 | 第29页 |
| ·小鼠颗粒细胞的冷冻与复苏 | 第29页 |
| ·G418筛选浓度的确定 | 第29-30页 |
| ·小鼠颗粒细胞的转染及筛选 | 第30页 |
| ·转基因细胞的鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-34页 |
| ·采集方式对小鼠颗粒细胞原代培养的影响 | 第31页 |
| ·采集方式对小鼠颗粒细胞传代培养的影响 | 第31-32页 |
| ·冷冻复苏对小鼠颗粒细胞的影响 | 第32-33页 |
| ·最适G418筛选浓度的确定 | 第33页 |
| ·G418筛选转基因细胞形态观察 | 第33页 |
| ·转基因细胞的PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 4 小鼠皮肤成纤维细胞的转染、筛选与鉴定 | 第36-42页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·实验药品 | 第36页 |
| ·实验仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·小鼠皮肤成纤维细胞的原代及传代培养 | 第37页 |
| ·G418筛选浓度的确定 | 第37页 |
| ·小鼠皮肤成纤维细胞的转染及筛选 | 第37-38页 |
| ·转基因小鼠皮肤成纤维细胞的鉴定 | 第38-39页 |
| ·实验结果 | 第39-41页 |
| ·小鼠皮肤成纤维细胞的原代培养及形态 | 第39页 |
| ·最适G418筛选浓度 | 第39-40页 |
| ·G418筛选后的转基因细胞形态观察 | 第40页 |
| ·转基因细胞的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
