| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-25页 |
| 前言 | 第25-28页 |
| 第一部分 寻常型银屑病患者PBMCs及皮损中DNA甲基化状态的研究 | 第28-61页 |
| 研究背景 | 第28-29页 |
| 材料与方法 | 第29-44页 |
| 1. 研究对象 | 第29-30页 |
| ·入选标准 | 第29页 |
| ·PASI评分 | 第29-30页 |
| 2. 主要仪器设备及试剂 | 第30-32页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第31-32页 |
| ·其他常用试剂 | 第32页 |
| 3. 实验方法 | 第32-43页 |
| ·外周血单核细胞(PBMCs)的分离 | 第32-33页 |
| ·PBMCs中DNA的抽提 | 第33-34页 |
| ·PBMCs中总体基因组DNA甲基化水平测定 | 第34-35页 |
| ·RNA抽提 | 第35页 |
| ·逆转录反应 | 第35-36页 |
| ·Real-time PCR | 第36-39页 |
| ·免疫组化 | 第39-40页 |
| ·甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP) | 第40-43页 |
| 4. 统计学方法 | 第43-44页 |
| 结果 | 第44-56页 |
| 1. 寻常型银屑病患者PBMCs中基因组DNA总体甲基化水平的变化 | 第44页 |
| ·总DNA的鉴定 | 第44页 |
| ·基因组DNA总体甲基化水平 | 第44页 |
| 2. 寻常型银屑病患者PBMCs中DNMTs mRNA及MBDs mRNA表达水平 | 第44-52页 |
| ·总RNA的电泳鉴定 | 第44-45页 |
| ·Real-time PCR反应结果 | 第45-52页 |
| 3. 寻常型银屑病皮损组织中5-甲基胞嘧啶的含量 | 第52-54页 |
| 4. 抑癌基因p14~(ARF)在寻常型银屑病患者皮损中的表达 | 第54-56页 |
| ·p14~(ARF) mRNA在寻常型银屑病患者皮损中低表达 | 第54-55页 |
| ·p14~(ARF)寻常型银屑病患者皮损组织中p14~(ARF)基因启动子甲基化状态 | 第55-56页 |
| 讨论 | 第56-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 第二部分 寻常型银屑病患者PBMCs组蛋白修饰的研究 | 第61-83页 |
| 研究背景 | 第61页 |
| 材料与方法 | 第61-69页 |
| 1. 研究对象 | 第61页 |
| 2. 主要仪器设备及试剂 | 第61-63页 |
| ·主要实验仪器 | 第61-62页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第62-63页 |
| ·其他常用试剂 | 第63页 |
| 3. 实验方法 | 第63-68页 |
| ·PBMCs中组蛋白的提取 | 第63页 |
| ·组蛋白浓度的测定 | 第63-64页 |
| ·组蛋白H3乙酰化检测 | 第64-65页 |
| ·组蛋白H4乙酰化检测 | 第65-66页 |
| ·组蛋白H3-K4甲基化检测 | 第66页 |
| ·组蛋白H3-K27三甲基化检测 | 第66-67页 |
| ·引物设计与合成 | 第67-68页 |
| 4. 统计学方法 | 第68-69页 |
| 结果 | 第69-79页 |
| 1. 组蛋白浓度测定 | 第69页 |
| 2. 组蛋白H3/H4乙酰化、H3-K4/H3-K27甲基化水平 | 第69-70页 |
| 3. 寻常型银屑病患者PBMCs中HATs mRNA及HDACs mRNA表达水平 | 第70-79页 |
| 讨论 | 第79-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 第三部分 寻常型银屑病患者PBMCs中microRNAs表达的变化 | 第83-103页 |
| 研究背景 | 第83页 |
| 材料与方法 | 第83-92页 |
| 1. 研究对象 | 第83-84页 |
| 2. 主要仪器设备及试剂 | 第84-86页 |
| ·主要实验仪器 | 第84-85页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第85页 |
| ·分析软件 | 第85页 |
| ·其他常用试剂 | 第85-86页 |
| 3. 实验步骤 | 第86-91页 |
| ·稀释ATP Mix | 第86页 |
| ·Poly(A)Tailing | 第86-87页 |
| ·生物素标记MiRNA | 第87页 |
| ·芯片杂交 | 第87-88页 |
| ·芯片清洗染色、扫描 | 第88页 |
| ·microRNA逆转录及Real-time PCR反应 | 第88-91页 |
| 4. 统计学方法 | 第91-92页 |
| 结果 | 第92-99页 |
| 1. Affymetrix microRNA表达芯片比较寻常型银屑病患者和健康对照外周血MCs中microRNAs表达水平 | 第92页 |
| 2. 采用Real-time PCR法验证Affymetrix microRNA芯片结果 | 第92-99页 |
| 讨论 | 第99-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 综述一 | 第110-119页 |
| 综述二 | 第119-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第128-129页 |
