中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-16页 |
缩略词表 | 第16-22页 |
前言 | 第22-30页 |
第一部分 Eotaxin在皮肤过敏性疾病中的表达调控 | 第30-86页 |
一、实验材料 | 第31-37页 |
(一) 动物和细胞 | 第31页 |
(二) 主要材料、试剂及配制 | 第31-36页 |
(三) 主要仪器设备 | 第36-37页 |
二、实验方法 | 第37-55页 |
(一) 小鼠接触性皮炎(ACD)模型的建立及样本采集 | 第37-38页 |
(二) 细胞培养 | 第38页 |
(三) 分子生物学、组织、细胞学检测 | 第38-55页 |
(四) 统计分析 | 第55页 |
三、结果 | 第55-80页 |
(一) Eotaxin在小鼠ACD中的表达规律研究 | 第55-68页 |
1、小鼠ACD模型的建立 | 第55-61页 |
2、小鼠ACD模型中eotaxin产生部位及动态规律 | 第61-68页 |
(二) Eotaxin在皮肤细胞中产生的调控机制研究 | 第68-80页 |
1、HaCaT细胞和真皮成纤维细胞(FBs)的培养 | 第68页 |
2、TNF-α及IL-4对HaCaT细胞及FBs表达eotaxin的诱导作用 | 第68-73页 |
3、TNF-α及IL-4诱导HaCaT细胞及FBs产生eotaxin的转录机制 | 第73-80页 |
四、讨论 | 第80-85页 |
小结 | 第85-86页 |
第二部分 苦参方提取物对小鼠接触·性皮炎的治疗作用及对eotaxin的抑制作用研究 | 第86-108页 |
一、实验材料 | 第90-92页 |
(一) 动物和细胞 | 第90页 |
(二) 主要材料、试剂、药品及配制 | 第90-92页 |
(三) 主要仪器设备 | 第92页 |
二、实验方法 | 第92-94页 |
(一) 小鼠ACD模型建立及实验分组 | 第92-93页 |
(二) 细胞培养与实验分组 | 第93页 |
(三) 分子生物学、组织、细胞学检测 | 第93-94页 |
(四) MTT法检测不同药物对细胞生存率的影响 | 第94页 |
(五) 统计分析 | 第94页 |
三、结果 | 第94-105页 |
(一) 苦参方提取物(KS)治疗小鼠ACD的疗效及机制研究 | 第94-99页 |
1、KS凝胶剂对小鼠ACD疗效观察 | 第94-98页 |
2、KS对小鼠ACD皮肤组织中eotaxin表达的影响 | 第98-99页 |
(二) KS抑制皮肤细胞中eotaxin表达机制研究 | 第99-105页 |
1、HaCaT细胞和FBs的培养 | 第99页 |
2、药物对HaCaT细胞和FBs生存率的影响 | 第99页 |
3、KS对两种皮肤细胞中TNF-α及IL-4诱导的eotaxin的影响 | 第99-103页 |
4、KS对HaCaT细胞和FBs中eotaxin抑制作用的转录机制 | 第103-105页 |
四、讨论 | 第105-107页 |
小结 | 第107-108页 |
第三部分:Eotaxin特异siRNA微乳(ESM)治疗小鼠接触性皮炎的初步研究 | 第108-135页 |
一、实验材料 | 第108-109页 |
(一) 动物和细胞 | 第108页 |
(二) 主要材料、试剂及配制 | 第108-109页 |
(三) 主要仪器设备 | 第109页 |
二、实验方法 | 第109-114页 |
(一) 细胞培养 | 第109页 |
(二) Eotaxin特异siRNA设计、合成、修饰及筛选 | 第109-111页 |
(三) siRNA微乳制备 | 第111-113页 |
(四) 细胞生存性实验 | 第113页 |
(五) 小鼠ACD模型的建立及给药 | 第113-114页 |
(六) 分子生物学、组织、细胞学检测 | 第114页 |
(七) 统计分析 | 第114页 |
三、结果 | 第114-131页 |
(一) 细胞培养 | 第114-115页 |
(二) Eotaxin specific siRNA筛选 | 第115-118页 |
1、转染条件筛选结果 | 第115-116页 |
2、Eotaxin siRNA敲除效率筛选 | 第116-118页 |
(三) siRNA微乳的质量稳定性及透皮效果考察 | 第118-124页 |
1、外观及包封情况 | 第118-119页 |
2、伪三元相图 | 第119-120页 |
3、理化性质考察 | 第120-121页 |
4、Eotaxin siRNA生物活性稳定性考察 | 第121-122页 |
5、siRNA微乳透皮性能考察 | 第122-124页 |
(四) Eotaxin siRNA对小鼠ACD的治疗作用及对皮肤eotaxin表达的影响 | 第124-131页 |
1、ESM对小鼠ACD耳肿胀度的影响 | 第124-125页 |
2、皮肤组织病理学观察 | 第125-126页 |
3、ESM对小鼠ACD血细胞计数的影响 | 第126页 |
4、ESM对小鼠ACD皮肤组织和血液中CD4+和CD8+T细胞的影响 | 第126-128页 |
5、ESM对小鼠ACD皮肤组织中eotaxin mRNA表达的影响 | 第128页 |
6、ESM小鼠ACD皮肤组织中eotaxin分泌的影响 | 第128-129页 |
7、激发前ESM给药时程对eotaxin在组织中表达的动态影响 | 第129-131页 |
四、讨论 | 第131-134页 |
小结 | 第134-135页 |
结论 | 第135-136页 |
综述 | 第136-147页 |
参考文献 | 第147-160页 |
附录 | 第160-163页 |
致谢 | 第163页 |