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Eotaxin在皮肤过敏性疾病中的表达调控及苦参方提取物与eotaxin siRNA的经皮治疗研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-16页
缩略词表第16-22页
前言第22-30页
第一部分 Eotaxin在皮肤过敏性疾病中的表达调控第30-86页
 一、实验材料第31-37页
  (一) 动物和细胞第31页
  (二) 主要材料、试剂及配制第31-36页
  (三) 主要仪器设备第36-37页
 二、实验方法第37-55页
  (一) 小鼠接触性皮炎(ACD)模型的建立及样本采集第37-38页
  (二) 细胞培养第38页
  (三) 分子生物学、组织、细胞学检测第38-55页
  (四) 统计分析第55页
 三、结果第55-80页
  (一) Eotaxin在小鼠ACD中的表达规律研究第55-68页
   1、小鼠ACD模型的建立第55-61页
   2、小鼠ACD模型中eotaxin产生部位及动态规律第61-68页
  (二) Eotaxin在皮肤细胞中产生的调控机制研究第68-80页
   1、HaCaT细胞和真皮成纤维细胞(FBs)的培养第68页
   2、TNF-α及IL-4对HaCaT细胞及FBs表达eotaxin的诱导作用第68-73页
   3、TNF-α及IL-4诱导HaCaT细胞及FBs产生eotaxin的转录机制第73-80页
 四、讨论第80-85页
 小结第85-86页
第二部分 苦参方提取物对小鼠接触·性皮炎的治疗作用及对eotaxin的抑制作用研究第86-108页
 一、实验材料第90-92页
  (一) 动物和细胞第90页
  (二) 主要材料、试剂、药品及配制第90-92页
  (三) 主要仪器设备第92页
 二、实验方法第92-94页
  (一) 小鼠ACD模型建立及实验分组第92-93页
  (二) 细胞培养与实验分组第93页
  (三) 分子生物学、组织、细胞学检测第93-94页
  (四) MTT法检测不同药物对细胞生存率的影响第94页
  (五) 统计分析第94页
 三、结果第94-105页
  (一) 苦参方提取物(KS)治疗小鼠ACD的疗效及机制研究第94-99页
   1、KS凝胶剂对小鼠ACD疗效观察第94-98页
   2、KS对小鼠ACD皮肤组织中eotaxin表达的影响第98-99页
  (二) KS抑制皮肤细胞中eotaxin表达机制研究第99-105页
   1、HaCaT细胞和FBs的培养第99页
   2、药物对HaCaT细胞和FBs生存率的影响第99页
   3、KS对两种皮肤细胞中TNF-α及IL-4诱导的eotaxin的影响第99-103页
   4、KS对HaCaT细胞和FBs中eotaxin抑制作用的转录机制第103-105页
 四、讨论第105-107页
 小结第107-108页
第三部分:Eotaxin特异siRNA微乳(ESM)治疗小鼠接触性皮炎的初步研究第108-135页
 一、实验材料第108-109页
  (一) 动物和细胞第108页
  (二) 主要材料、试剂及配制第108-109页
  (三) 主要仪器设备第109页
 二、实验方法第109-114页
  (一) 细胞培养第109页
  (二) Eotaxin特异siRNA设计、合成、修饰及筛选第109-111页
  (三) siRNA微乳制备第111-113页
  (四) 细胞生存性实验第113页
  (五) 小鼠ACD模型的建立及给药第113-114页
  (六) 分子生物学、组织、细胞学检测第114页
  (七) 统计分析第114页
 三、结果第114-131页
  (一) 细胞培养第114-115页
  (二) Eotaxin specific siRNA筛选第115-118页
   1、转染条件筛选结果第115-116页
   2、Eotaxin siRNA敲除效率筛选第116-118页
  (三) siRNA微乳的质量稳定性及透皮效果考察第118-124页
   1、外观及包封情况第118-119页
   2、伪三元相图第119-120页
   3、理化性质考察第120-121页
   4、Eotaxin siRNA生物活性稳定性考察第121-122页
   5、siRNA微乳透皮性能考察第122-124页
  (四) Eotaxin siRNA对小鼠ACD的治疗作用及对皮肤eotaxin表达的影响第124-131页
   1、ESM对小鼠ACD耳肿胀度的影响第124-125页
   2、皮肤组织病理学观察第125-126页
   3、ESM对小鼠ACD血细胞计数的影响第126页
   4、ESM对小鼠ACD皮肤组织和血液中CD4+和CD8+T细胞的影响第126-128页
   5、ESM对小鼠ACD皮肤组织中eotaxin mRNA表达的影响第128页
   6、ESM小鼠ACD皮肤组织中eotaxin分泌的影响第128-129页
   7、激发前ESM给药时程对eotaxin在组织中表达的动态影响第129-131页
 四、讨论第131-134页
 小结第134-135页
结论第135-136页
综述第136-147页
参考文献第147-160页
附录第160-163页
致谢第163页

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