致谢 | 第1-10页 |
缩略词 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-40页 |
前言 | 第17页 |
1 植物microRNA作用机制 | 第17-26页 |
·植物miRNA的发现 | 第17-19页 |
·植物miRNA的生物合成 | 第19-22页 |
·植物miRNA的作用机制 | 第22-24页 |
·植物miRNA靶基因的识别和鉴定 | 第24页 |
·植物miRNA的表达和调控 | 第24-25页 |
·植物miRNA与动物miRNA的区别 | 第25-26页 |
2 植物microRNA功能研究 | 第26-31页 |
·植物miRNA对生长发育的调控 | 第27页 |
·植物miRNA对环境胁迫的应答 | 第27-30页 |
·植物miRNA在生长素信号通路中的作用 | 第30-31页 |
3 植物MIR393基因研究进展 | 第31-38页 |
·植物miR393的保守性和序列分析 | 第31-33页 |
·拟南芥miR393的靶基因研究 | 第33-37页 |
·拟南芥miR393的表达模式研究 | 第37-38页 |
·拟南芥miR393的功能研究 | 第38页 |
4 本研究的内容和意义 | 第38-40页 |
第二章 拟南芥MIR393基因家族表达模式研究 | 第40-56页 |
1 材料和方法 | 第40-48页 |
·材料 | 第40页 |
·试剂和主要仪器 | 第40页 |
·拟南芥的培养 | 第40-41页 |
·启动子克隆和表达载体构建 | 第41-42页 |
·拟南芥转基因及筛选 | 第42页 |
·植物RNA提取 | 第42-43页 |
·Small RNA Northern Blot | 第43-46页 |
·半定量RT-PCR | 第46-47页 |
·GUS蛋白的组织化学染色 | 第47-48页 |
2 实验结果 | 第48-53页 |
·拟南芥miR393的组织特异性表达 | 第48页 |
·拟南芥MIR393基因家族表达模式 | 第48-51页 |
·拟南芥miR393靶基因的组织特异性表达 | 第51-53页 |
3 讨论 | 第53-56页 |
·拟南芥MIR393家族表达模式的比较 | 第53-54页 |
·拟南芥MIR393家族与靶基因家族表达的相互关系 | 第54-56页 |
第三章 外源激素和非生物胁迫下拟南芥MIR393基因家族的转录调控研究 | 第56-68页 |
1 材料与方法 | 第56-59页 |
·材料 | 第56页 |
·试剂和主要仪器 | 第56页 |
·IAA处理 | 第56-57页 |
·ABA及非生物胁迫处理 | 第57页 |
·植物RNA提取 | 第57页 |
·Small RNA Northern blot | 第57页 |
·实时定量RT-PCR | 第57-58页 |
·GUS蛋白的组织化学染色 | 第58-59页 |
2 实验结果 | 第59-65页 |
·高浓度IAA处理诱导拟南芥miR393的表达 | 第59-60页 |
·高浓度IAA能增强4tMIR393b的转录 | 第60-61页 |
·外源IAA对miR393的诱导不依赖于靶基因TIR1/AFBs | 第61-62页 |
·靶基因受到miR393的转录后调控 | 第62-63页 |
·ABA和甘露醇诱导MIR393a的表达,2,4-D和冷处理诱导MIR393b的表达 | 第63-65页 |
3 讨论 | 第65-68页 |
·外源高浓度生长素诱导拟南芥miR393的积累 | 第65-66页 |
·拟南芥miR393在生长素处理下通过转录后调控维持靶基因的稳定性 | 第66页 |
·ABA和非生物胁迫诱导的AtMIR393基因家族差异表达 | 第66-68页 |
第四章 拟南芥miR393在生长素信号通路和生长发育中的功能研究 | 第68-97页 |
1 材料与方法 | 第68-76页 |
·材料 | 第68页 |
·试剂和主要仪器 | 第68页 |
·miR393过量表达载体构建和转基因拟南芥的获得 | 第68-69页 |
·TIR1和mTIR1过量表达载体构建和转基因拟南芥的获得 | 第69-71页 |
·Northern blot检测 | 第71-73页 |
·实时定量PCR | 第73页 |
·根表型分析 | 第73-74页 |
·叶表型观察 | 第74页 |
·拟南芥IAA含量测定 | 第74-75页 |
·拟南芥的干旱和高盐胁迫处理 | 第75-76页 |
·ABA处理下种子萌发率测定 | 第76页 |
·ATH1基因芯片杂交 | 第76页 |
2 实验结果 | 第76-91页 |
·miR393的过量表达及对靶基因水平的影响 | 第76-78页 |
·35S:mTIR1植株中TIR1转录物的水平明显高于35S:TIR1 | 第78-79页 |
·miR393介导的对TIR1的调控影响下胚轴和根的发育 | 第79-81页 |
·35S:mTIRl转基因系表现出多效性生长素相关表型 | 第81-83页 |
·miR393对TIR1的调控影响植株对生长素的敏感性 | 第83-85页 |
·miR393对TIR1的调控影响植株的IAA含量 | 第85页 |
·miR393过量表达对植株干旱和高盐胁迫的抗性无显著影响 | 第85-86页 |
·miR393对TIR1的调控影响种子在ABA处理下的萌发率 | 第86-88页 |
·35S:MIR393a与35S:mTIR1转基因系基因芯片结果 | 第88-90页 |
·miR393受到靶基因TIR1的正向反馈调控 | 第90-91页 |
3 讨论 | 第91-97页 |
·miR393过量表达显著下调靶基因TIR1的mRNA水平 | 第91-92页 |
·拟南芥miR393介导的对TIR1的调控影响植株的生长发育 | 第92-93页 |
·拟南芥miR393介导的对TIR1的调控影响了植株的生长素敏感性 | 第93-94页 |
·拟南芥miR393在非生物胁迫中的潜在作用 | 第94-95页 |
·拟南芥miR393表达受到反馈调控 | 第95-97页 |
第五章 总结和展望 | 第97-100页 |
参考文献 | 第100-114页 |
附录:抗生素及培养基母液配方 | 第114-116页 |
作者简介 | 第116页 |