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拟南芥microRNA393的表达模式、调控机制和功能研究

致谢第1-10页
缩略词第10-11页
摘要第11-14页
Abstract第14-17页
第一章 文献综述第17-40页
 前言第17页
 1 植物microRNA作用机制第17-26页
   ·植物miRNA的发现第17-19页
   ·植物miRNA的生物合成第19-22页
   ·植物miRNA的作用机制第22-24页
   ·植物miRNA靶基因的识别和鉴定第24页
   ·植物miRNA的表达和调控第24-25页
   ·植物miRNA与动物miRNA的区别第25-26页
 2 植物microRNA功能研究第26-31页
   ·植物miRNA对生长发育的调控第27页
   ·植物miRNA对环境胁迫的应答第27-30页
   ·植物miRNA在生长素信号通路中的作用第30-31页
 3 植物MIR393基因研究进展第31-38页
   ·植物miR393的保守性和序列分析第31-33页
   ·拟南芥miR393的靶基因研究第33-37页
   ·拟南芥miR393的表达模式研究第37-38页
   ·拟南芥miR393的功能研究第38页
 4 本研究的内容和意义第38-40页
第二章 拟南芥MIR393基因家族表达模式研究第40-56页
 1 材料和方法第40-48页
   ·材料第40页
   ·试剂和主要仪器第40页
   ·拟南芥的培养第40-41页
   ·启动子克隆和表达载体构建第41-42页
   ·拟南芥转基因及筛选第42页
   ·植物RNA提取第42-43页
   ·Small RNA Northern Blot第43-46页
   ·半定量RT-PCR第46-47页
   ·GUS蛋白的组织化学染色第47-48页
 2 实验结果第48-53页
   ·拟南芥miR393的组织特异性表达第48页
   ·拟南芥MIR393基因家族表达模式第48-51页
   ·拟南芥miR393靶基因的组织特异性表达第51-53页
 3 讨论第53-56页
   ·拟南芥MIR393家族表达模式的比较第53-54页
   ·拟南芥MIR393家族与靶基因家族表达的相互关系第54-56页
第三章 外源激素和非生物胁迫下拟南芥MIR393基因家族的转录调控研究第56-68页
 1 材料与方法第56-59页
   ·材料第56页
   ·试剂和主要仪器第56页
   ·IAA处理第56-57页
   ·ABA及非生物胁迫处理第57页
   ·植物RNA提取第57页
   ·Small RNA Northern blot第57页
   ·实时定量RT-PCR第57-58页
   ·GUS蛋白的组织化学染色第58-59页
 2 实验结果第59-65页
   ·高浓度IAA处理诱导拟南芥miR393的表达第59-60页
   ·高浓度IAA能增强4tMIR393b的转录第60-61页
   ·外源IAA对miR393的诱导不依赖于靶基因TIR1/AFBs第61-62页
   ·靶基因受到miR393的转录后调控第62-63页
   ·ABA和甘露醇诱导MIR393a的表达,2,4-D和冷处理诱导MIR393b的表达第63-65页
 3 讨论第65-68页
   ·外源高浓度生长素诱导拟南芥miR393的积累第65-66页
   ·拟南芥miR393在生长素处理下通过转录后调控维持靶基因的稳定性第66页
   ·ABA和非生物胁迫诱导的AtMIR393基因家族差异表达第66-68页
第四章 拟南芥miR393在生长素信号通路和生长发育中的功能研究第68-97页
 1 材料与方法第68-76页
   ·材料第68页
   ·试剂和主要仪器第68页
   ·miR393过量表达载体构建和转基因拟南芥的获得第68-69页
   ·TIR1和mTIR1过量表达载体构建和转基因拟南芥的获得第69-71页
   ·Northern blot检测第71-73页
   ·实时定量PCR第73页
   ·根表型分析第73-74页
   ·叶表型观察第74页
   ·拟南芥IAA含量测定第74-75页
   ·拟南芥的干旱和高盐胁迫处理第75-76页
   ·ABA处理下种子萌发率测定第76页
   ·ATH1基因芯片杂交第76页
 2 实验结果第76-91页
   ·miR393的过量表达及对靶基因水平的影响第76-78页
   ·35S:mTIR1植株中TIR1转录物的水平明显高于35S:TIR1第78-79页
   ·miR393介导的对TIR1的调控影响下胚轴和根的发育第79-81页
   ·35S:mTIRl转基因系表现出多效性生长素相关表型第81-83页
   ·miR393对TIR1的调控影响植株对生长素的敏感性第83-85页
   ·miR393对TIR1的调控影响植株的IAA含量第85页
   ·miR393过量表达对植株干旱和高盐胁迫的抗性无显著影响第85-86页
   ·miR393对TIR1的调控影响种子在ABA处理下的萌发率第86-88页
   ·35S:MIR393a与35S:mTIR1转基因系基因芯片结果第88-90页
   ·miR393受到靶基因TIR1的正向反馈调控第90-91页
 3 讨论第91-97页
   ·miR393过量表达显著下调靶基因TIR1的mRNA水平第91-92页
   ·拟南芥miR393介导的对TIR1的调控影响植株的生长发育第92-93页
   ·拟南芥miR393介导的对TIR1的调控影响了植株的生长素敏感性第93-94页
   ·拟南芥miR393在非生物胁迫中的潜在作用第94-95页
   ·拟南芥miR393表达受到反馈调控第95-97页
第五章 总结和展望第97-100页
参考文献第100-114页
附录:抗生素及培养基母液配方第114-116页
作者简介第116页

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