| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 植物生长与低温胁迫 | 第11-12页 |
| 1.1.1 低温对植物的危害 | 第11页 |
| 1.1.2 植物对低温的响应 | 第11-12页 |
| 1.2 蛋白质组学简介 | 第12-14页 |
| 1.2.1 蛋白质组学的概念 | 第12页 |
| 1.2.2 蛋白质组学的研究方法 | 第12-14页 |
| 1.3 低温胁迫下冬小麦蛋白质组学研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 低温胁迫对冬小麦光合作用相关蛋白的影响 | 第14-15页 |
| 1.3.2 低温胁迫对冬小麦代谢相关蛋白的影响 | 第15页 |
| 1.3.3 冷驯化期间冬小麦相关蛋白的变化 | 第15页 |
| 1.3.4 春化作用期间冬小麦相关蛋白的变化 | 第15-16页 |
| 1.3.5 零下低温对冬小麦抗冻相关蛋白的影响 | 第16页 |
| 1.4 东农冬麦1号的特性和研究现况 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 试验植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 试验试剂与试剂盒 | 第18-19页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 试验材料的获得 | 第20页 |
| 2.2.2 分蘖节总蛋白的提取 | 第20页 |
| 2.2.3 蛋白质的定量 | 第20页 |
| 2.2.4 总蛋白的SDS-PAGE | 第20-21页 |
| 2.2.5 蛋白样品的还原、烷基化和胰蛋白酶水解 | 第21页 |
| 2.2.6 TMT标记和强阳离子交换分离 | 第21页 |
| 2.2.7 质谱鉴定及数据分析 | 第21-22页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.9 部分差异蛋白基因的qRT-PCR验证 | 第22-23页 |
| 2.2.10 过表达烟草植株中丙酮酸脱氢酶α亚基(TaE1α)的检测分析 | 第23-26页 |
| 2.2.11 试验技术路线 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-46页 |
| 3.1 蛋白质的定量分析及检测 | 第27-28页 |
| 3.1.1 蛋白质定量结果 | 第27页 |
| 3.1.2 SDS-PAGE结果 | 第27-28页 |
| 3.2 初级质谱数据的分析和差异蛋白的鉴定 | 第28-30页 |
| 3.2.1 基本鉴定信息 | 第28-29页 |
| 3.2.2 差异蛋白统计 | 第29-30页 |
| 3.3 差异蛋白的亚细胞定位预测 | 第30-31页 |
| 3.4 差异蛋白的功能注释 | 第31-33页 |
| 3.4.1 GO注释 | 第31-32页 |
| 3.4.2 COG注释 | 第32页 |
| 3.4.3 KEGG注释 | 第32-33页 |
| 3.5 差异蛋白的功能分类及代谢图谱绘制 | 第33-39页 |
| 3.6 部分差异蛋白的qRT-PCR验证 | 第39-42页 |
| 3.7 过表达烟草植株中TaE1α的检测分析 | 第42-44页 |
| 3.7.1 TaE1α的克隆 | 第42页 |
| 3.7.2 TaE1α过表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.7.3 重组质粒的检测 | 第43-44页 |
| 3.7.4 TaE1α在烟草叶片中的过表达结果分析 | 第44页 |
| 3.8 TaE1α在拟南芥中过表达 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| 4.1 低温胁迫对冬小麦分蘖节差异表达蛋白的功能探讨 | 第46-49页 |
| 4.1.1 代谢相关蛋白 | 第46-47页 |
| 4.1.2 胁迫和防御相关蛋白 | 第47-48页 |
| 4.1.3 转录翻译相关蛋白 | 第48页 |
| 4.1.4 信号转导和运输相关蛋白 | 第48-49页 |
| 4.1.5 光合作用及细胞组分相关蛋白 | 第49页 |
| 4.2 差异蛋白在基因水平与蛋白质水平变化不一致的原因 | 第49-50页 |
| 4.3 过表达烟草植株中TaE1α的检测分析 | 第50页 |
| 4.4 下步工作展望 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
