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大港油田石油污染土壤细菌多样性及其与环境因子关系的研究

摘要第3-4页
abstract第4页
第1章 文献综述第9-21页
    1.1 土壤微生物多样性第9-12页
        1.1.1 土壤微生物物种多样性第9-10页
        1.1.2 微生物遗传多样性第10页
        1.1.3 功能多样性第10-11页
        1.1.4 土壤微生物生态类型的多样性第11-12页
    1.2 土壤微生物多样性的研究方法第12-15页
        1.2.1 平板培养法第12页
        1.2.2 Biology微平板法第12-13页
        1.2.3 磷脂脂肪酸法(PLFA)第13页
        1.2.4 末端限制性长度多态性技术第13-14页
        1.2.5 变性梯度凝胶电泳第14页
        1.2.6 高通量测序技术第14-15页
    1.3 石油污染土壤的影响第15-16页
        1.3.1 石油污染物对土壤理化性质的影响第15页
        1.3.2 石油污染物对土壤微生物群落的影响第15页
        1.3.3 石油污染物对陆生植物的影响第15-16页
    1.4 微生物修复石油污染土壤的方法第16-17页
        1.4.1 生物刺激法第16页
        1.4.2 生物强化法第16页
        1.4.3 固定化微生物技术第16-17页
        1.4.4 植物-微生物联用技术第17页
    1.5 微生物次级代谢产物第17-19页
        1.5.1 抑菌活性第17-18页
        1.5.2 抗肿瘤活性第18-19页
        1.5.3 免疫抑制第19页
    1.6 本文的研究意义和研究内容第19-21页
        1.6.1 研究意义第19-20页
        1.6.2 研究内容第20-21页
第2章 材料与方法第21-29页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 实验设备第21-22页
        2.1.2 实验试剂第22页
        2.1.3 培养基第22页
    2.2 大港油田地理条件和土壤采集第22-23页
        2.2.1 大港油田自然地理条件第22-23页
        2.2.2 样品采集和土壤处理第23页
    2.3 土壤理化性质测定第23-24页
        2.3.1 土壤含油量测定第23页
        2.3.2 土壤含水量测定第23页
        2.3.3 土壤pH测定第23-24页
        2.3.4 土壤电导率的测定第24页
        2.3.5 土壤中有机质含量的测定第24页
        2.3.6 土壤中全氮的测定第24页
        2.3.7 土壤中总磷含量的测定第24页
        2.3.8 土壤中总钾的测定第24页
    2.4 扩增子测序流程第24-27页
        2.4.1 土壤微生物基因组DNA提取第24-25页
        2.4.2 PCR扩增第25页
        2.4.3 PCR产物纯化第25-26页
        2.4.4 文库构建和上机测序第26页
        2.4.5 生物信息分析流程第26页
        2.4.6 宏基因组KEGG数据库标准注释过程第26-27页
    2.5 细菌次级代谢产物研究第27-29页
        2.5.1 土壤样品菌悬液制备第27页
        2.5.2 菌悬液中细菌分离第27页
        2.5.3 种子液制备第27页
        2.5.4 发酵液制备第27页
        2.5.5 HPLC液相检测和制备第27-28页
        2.5.6 抗菌活性测定(牛津杯法)第28-29页
第3章 大港油田不同生境细菌 16S r RNA基因多样性的研究第29-53页
    3.1 土壤石油含量(TPH)测定结果第29-31页
    3.2 大港油田土壤物种注释结果第31-35页
        3.2.1 物种注释结果统计第31-32页
        3.2.2 特定物种分类树第32-35页
    3.3 大港油田土壤各分类水平下细菌群落相对丰度柱状图第35-40页
        3.3.1 门分类水平细菌群落组成第35-37页
        3.3.2 纲分类水平细菌群落组成第37-38页
        3.3.3 属分类水平细菌群落组成第38-40页
    3.4 Heatmap热图分析第40-42页
    3.5 样品复杂度分析(Alpha Diversity)第42-47页
        3.5.1 Alpha多样性指数第42-43页
        3.5.2 物种多样性曲线第43-45页
        3.5.3 物种累积箱型图第45-46页
        3.5.4 Venn图第46-47页
    3.6 多样品比较分析(Beta Diversity)第47-51页
        3.6.1 NMDS第47-48页
        3.6.2 Anosim第48-49页
        3.6.3 LEf Se分析第49-51页
    3.7 讨论第51-53页
第4章 大港油田土壤理化性质对菌群分布的影响第53-67页
    4.1 环境因子与土壤中细菌群落分布的相关分析第53-59页
        4.1.1 26样品表土壤理化性质测定结果及分析第53-54页
        4.1.2 土壤各个环境因子间相关性分析第54-55页
        4.1.3 Spearman相关性分析第55-57页
        4.1.4 Spearman相关性分析热图第57-58页
        4.1.5 Mental test分析第58-59页
    4.2 RDA分析第59-61页
    4.3 PCo A分析第61-63页
    4.4 VPA分析第63-64页
    4.5 讨论第64-67页
第5章 大港油田滨海土壤来源细菌次级代谢产物的研究第67-81页
    5.1 宏基因组KEGG数据库标准注释第67-69页
        5.1.1 土壤细菌代谢通路热图(第三等级)第67-68页
        5.1.2 土壤细菌代谢通路(第三等级)柱形图第68-69页
    5.2 大港油田土壤中可培养细菌的分离以及抗生素产生菌的筛选第69-71页
    5.3 LWYZ003菌株多相分类鉴定第71-73页
        5.3.1 分子生物学鉴定第71-72页
        5.3.2 微生物表型鉴定与生理生化鉴定:第72-73页
    5.4 解淀粉芽孢杆菌LWYZ003次级代谢产物中抗生素的分离鉴定第73-78页
        5.4.1 抗菌活性物质的分离纯化第73-74页
        5.4.2 物质结构鉴定:第74-76页
        5.4.3 次级代谢产物抑菌活性:第76-78页
    5.5 讨论第78-81页
第6章 结论与展望第81-83页
    6.1 结论第81-82页
    6.2 展望第82-83页
参考文献第83-89页
发表论文和参加科研情况说明第89-91页
致谢第91页

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