致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 产酶溶杆菌OH11的简介 | 第12-20页 |
1.1.1 产酶溶杆菌OH11生物学特征 | 第12-18页 |
1.1.2 产酶溶杆菌OH11调控机理方面的研究进展 | 第18-20页 |
1.2 细菌的自溶研究进展 | 第20-25页 |
1.2.1 N-乙酰-L-丙氨酸酰胺酶 | 第21-22页 |
1.2.2 N-乙酰胞壁酸酶 | 第22页 |
1.2.3 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 | 第22-23页 |
1.2.4 内肽酶 | 第23-24页 |
1.2.5 转糖苷酶 | 第24-25页 |
2 引言 | 第25-27页 |
3 材料与方法 | 第27-47页 |
3.1 实验材料 | 第27-34页 |
3.1.1 供试菌株、培养条件及菌种保存方式 | 第27-29页 |
3.1.2 引物设计 | 第29-32页 |
3.1.3 培养基 | 第32-34页 |
3.1.4 供试仪器与试剂、酶和抗生素 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-47页 |
3.2.1 OH11基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
3.2.2 DNA操作方法和体系 | 第35-37页 |
3.2.3 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第37-38页 |
3.2.4 重组载体的构建 | 第38页 |
3.2.5 质粒提取与双酶切验证 | 第38-39页 |
3.2.6 电转感受态的制备以及突变体的筛选 | 第39-40页 |
3.2.7 互补菌株的构建 | 第40页 |
3.2.8 生长曲线测定 | 第40-41页 |
3.2.9 自溶度检测 | 第41页 |
3.2.10 HSAF的提取及HPLC检测 | 第41-42页 |
3.2.11 Twitching Motility检测 | 第42-43页 |
3.2.12 菌落形态的观察 | 第43页 |
3.2.13 四种胞外酶检测 | 第43-44页 |
3.2.14 转录组 | 第44页 |
3.2.15 相对实时荧光定量和反转录 | 第44-46页 |
3.2.16 数据处理 | 第46-47页 |
4 结果与分析 | 第47-60页 |
4.1 转录组取样点测定 | 第47页 |
4.2 转录组数据分析 | 第47-48页 |
4.3 转录组数据验证 | 第48-49页 |
4.4 敲除载体验证 | 第49-50页 |
4.5 突变菌株验证 | 第50-51页 |
4.6 互补菌株验证 | 第51-52页 |
4.7 突变菌株的生长曲线测定 | 第52-53页 |
4.8 突变菌株的自溶度检测 | 第53-54页 |
4.9 突变菌株的HSAF产量检测 | 第54-56页 |
4.10 突变菌株的荧光定量实验 | 第56页 |
4.11 突变菌株的四种胞外酶检测 | 第56-57页 |
4.12 突变菌株的Twitching Motility检测 | 第57-58页 |
4.13 突变菌株的菌落形态观察 | 第58-60页 |
5 小结与讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
作者简介 | 第67页 |