中文摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-18页 |
研究现状、成果 | 第14-16页 |
研究目的、方法及意义 | 第16-18页 |
一、H/R诱导H9C2细胞损伤模型的建立及MV的提取和鉴定 | 第18-37页 |
1.1 H/R诱导H9C2细胞损伤模型的建立 | 第18-25页 |
1.1.1 实验对象 | 第18-20页 |
1.1.1.1 实验材料 | 第18-19页 |
1.1.1.2 实验耗材与器材 | 第19页 |
1.1.1.3 药品与试剂 | 第19-20页 |
1.1.2 实验方法 | 第20-23页 |
1.1.2.1 主要溶液的配制 | 第20-21页 |
1.1.2.2 细胞的培养 | 第21-22页 |
1.1.2.3 实验分组级H/R损伤模型的建立 | 第22页 |
1.1.2.4 MTT法检测细胞存活率 | 第22-23页 |
1.1.2.5 流式检测细胞凋亡 | 第23页 |
1.1.2.6 数据处理 | 第23页 |
1.1.3 结果 | 第23-24页 |
1.1.4 讨论 | 第24-25页 |
1.1.5 小结 | 第25页 |
1.2 H9C2心肌细胞来源的MV的提取和鉴定 | 第25-37页 |
1.2.1 对象和方法 | 第25-31页 |
1.2.1.1 实验材料 | 第25-27页 |
1.2.1.2 Wistar大鼠Vfib细胞的提取 | 第27-28页 |
1.2.1.3 H/R诱导H9C2细胞释放MV | 第28页 |
1.2.1.4 电子显微镜观察提取到的MV | 第28页 |
1.2.1.5 激光共聚焦观察不同细胞对MV的摄取 | 第28-29页 |
1.2.1.6 MV中蛋白的提取及定量 | 第29页 |
1.2.1.7 Western blot检测 | 第29-30页 |
1.2.1.8 数据处理 | 第30-31页 |
1.2.2 结果 | 第31-33页 |
1.2.3 讨论 | 第33-36页 |
1.2.4 小结 | 第36-37页 |
二、药物对H/R诱导心肌细胞损伤的干预作用 | 第37-59页 |
2.1 雷诺嗪对H/R诱导H9C2细胞损伤的干预作用 | 第37-49页 |
2.1.1 对象和方法 | 第37-38页 |
2.1.1.1 实验材料 | 第37页 |
2.1.1.2 实验耗材与器材 | 第37页 |
2.1.1.3 药品与试剂 | 第37-38页 |
2.1.2 实验方法 | 第38-42页 |
2.1.2.1 主要溶液的配制 | 第38页 |
2.1.2.2 细胞的培养 | 第38-39页 |
2.1.2.3 RT-PCR检测P2X7,Caspase-1,NLRP3 mRNA的表达 | 第39-40页 |
2.1.2.4 细胞总蛋白的提取过程及蛋白定量 | 第40-41页 |
2.1.2.5 ELISA检测细胞上清中IL-1β及IL-18的含量 | 第41页 |
2.1.2.6 MV的流式计数 | 第41-42页 |
2.1.2.7 统计学方法 | 第42页 |
2.1.3 结果 | 第42-45页 |
2.1.4 讨论 | 第45-49页 |
2.1.5 小结 | 第49页 |
2.2 P2X7R对H/R诱导心肌细胞释放MV的调控 | 第49-59页 |
2.2.1 对象和方法 | 第49-50页 |
2.2.1.1 实验材料 | 第49页 |
2.2.1.2 实验耗材与器材 | 第49页 |
2.2.1.3 药品与试剂 | 第49-50页 |
2.2.2 实验方法 | 第50-52页 |
2.2.2.1 主要溶液的配制 | 第50页 |
2.2.2.2 细胞的培养 | 第50页 |
2.2.2.3 蛋白提取及western blot检测 | 第50页 |
2.2.2.4 细胞上清MV计数 | 第50页 |
2.2.2.5 激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca~(2+)浓度 | 第50-51页 |
2.2.2.6 细胞内ATP浓度测定 | 第51-52页 |
2.2.2.7 统计学方法 | 第52页 |
2.2.3 结果 | 第52-54页 |
2.2.4 讨论 | 第54-57页 |
2.2.5 小结 | 第57-59页 |
三、雷诺嗪对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的干预作用 | 第59-83页 |
3.1 对象和方法 | 第59-65页 |
3.1.1 实验动物和分组 | 第59页 |
3.1.2 试验设备及试剂 | 第59-60页 |
3.1.3 大鼠缺血/再灌注(I/R)模型的建立 | 第60-61页 |
3.1.4 乳酸脱氢酶(LDH),HMGB1,IL-1β及IL-18的ELISA检测 | 第61-63页 |
3.1.5 血浆中MV数量的检测 | 第63页 |
3.1.6 病理观察 | 第63-65页 |
3.1.7 Western blot法检测心肌组织蛋白含量 | 第65页 |
3.1.8 统计学方法 | 第65页 |
3.2 结果 | 第65-71页 |
3.3 讨论 | 第71-82页 |
3.4 小结 | 第82-83页 |
全文结论 | 第83-84页 |
论文创新点 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-102页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第102-103页 |
综述 微囊泡参与炎症反应研究进展 | 第103-110页 |
综述参考文献 | 第106-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
个人简历 | 第111页 |