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小麦TaCIPK5、TaCIPK8基因的表达分析及与TaCBLs的互作关系

致谢第4-7页
摘要第7-9页
1 文献综述第9-18页
    1.1 植物逆境胁迫和应对方式第9页
        1.1.1 植物逆境胁迫第9页
        1.1.2 植物应对逆境胁迫的方式第9页
    1.2 植物应对非生物胁迫的生理机制第9-11页
        1.2.1 直接作用物质第10页
        1.2.2 间接作用物质第10-11页
    1.3 钙信使及钙信号的传导第11-14页
        1.3.1 钙依赖蛋白激酶CDPKs第11-12页
        1.3.2 钙调素CaM和类钙调素蛋白CmL第12页
        1.3.3 CBLs蛋白及其靶蛋白CIPKs第12-14页
    1.4 CBLs-CIPKs信号系统第14-18页
        1.4.1 CBLs-CIPKs信号网络的机制第14页
        1.4.2 CBLs-CIPKs信号系统的功能研究第14-18页
2 引言第18-19页
3 试验材料与方法第19-29页
    3.1 试验材料第19-20页
        3.1.1 植物材料和菌株第19页
        3.1.2 克隆载体第19页
        3.1.3 生化试剂和试剂盒第19页
        3.1.4 试验仪器第19页
        3.1.5 PCR引物第19-20页
    3.2 试验方法第20-24页
        3.2.1 RNA提取及反转录反应第20-21页
        3.2.2 目的基因克隆第21-24页
    3.3 小麦TaCIPK5和TaCIPK8基因的生物信息学分析第24页
    3.4 TaCIPK5和TaCIPK8基因的表达水平分析第24-25页
        3.4.1 材料的处理第24页
        3.4.2 荧光引物的合成和RT-PCR反应第24-25页
        3.4.3 荧光实时定量PCR的结果分析第25页
    3.5 TaCBLs和TaCIPKs的酵母双杂交试验分析第25-29页
        3.5.1 酵母双杂交所用载体和菌株第25页
        3.5.2 试剂和培养基第25-26页
        3.5.3 目的基因和酵母双杂交表达载体的构建第26页
        3.5.4 酵母感受态细胞制备和重组质粒的转化及鉴定第26-28页
        3.5.5 融合蛋白自激活活性的测定第28页
        3.5.6 酵母双杂交及其蛋白相互作用的鉴定第28-29页
4 结果与分析第29-43页
    4.1 RNA及cDNA检测第29页
    4.2 小麦TaCIPK5和TaCIPK8基因的全长克隆第29-30页
    4.3 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的生物信息学分析第30-35页
        4.3.1 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的理化性质分析第30页
        4.3.2 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的疏水性/亲水性预测与分析第30-31页
        4.3.3 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的跨膜结构域预测第31-32页
        4.3.4 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的同源性分析第32-33页
        4.3.5 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白序列的功能结构域分析第33-34页
        4.3.6 小麦TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的磷酸化位点分析第34-35页
    4.4 小麦TaCIPK5和TaCIPK8基因的表达分析第35-38页
        4.4.1 融解曲线分析第35-36页
        4.4.2 小麦TaCIPK5基因的表达分析第36-37页
        4.4.3 小麦TaCIPK8基因的表达分析第37-38页
    4.5 小麦TaCIPKs与TaCBLs蛋白的互作分析第38-43页
        4.5.1 酵母双杂交表达载体的构建及鉴定第38-39页
        4.5.2 重组质粒转化及鉴定第39-40页
        4.5.3 融合蛋白毒性和自激活活性检测第40-41页
        4.5.4 TaCBLs与TaCIPKs相互作用鉴定第41-43页
5 结论与讨论第43-46页
    5.1 小麦TaCIPK5和TaCIPK8基因的克隆第43页
    5.2 TaCIPK5和TaCIPK8蛋白的生物信息学分析第43页
    5.3 不同胁迫下TaCIPK5和TaCIPK8基因的表达分析第43-44页
    5.4 酵母双杂交试验检测TaCBLs和TaCIPKs基因的相互作用第44-45页
    5.5 全文结论第45-46页
参考文献第46-52页
ABSTRACT第52-53页
英文缩略表第54页

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