| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 叶酸与损伤修复 | 第10-11页 |
| 1.2 叶酸与肿瘤 | 第11-12页 |
| 1.3 microRNA-21与错配修复基因hMSH2 | 第12-14页 |
| 1.4 前期基础工作 | 第14-15页 |
| 第2章 实验材料及实验方法 | 第15-32页 |
| 2.1 实验材料和实验用试剂 | 第15-17页 |
| 2.1.1 实验细胞株 | 第15页 |
| 2.1.2 主要设备仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要化学试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第17-32页 |
| 2.2.1 细胞培养和干预 | 第17-18页 |
| 2.2.2 细胞涂片及CBMN-Cyt实验 | 第18-19页 |
| 2.2.3 统计学分析 | 第19页 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告基因检测并验证miR-21-5p与hMSH2靶向关系 | 第19-24页 |
| 2.2.5 RNA和miRNA的提取与分离 | 第24-27页 |
| 2.2.6 RT-qPCR检测分析hMSH2、PDCD4和PCNA的mRNA表达量 | 第27-28页 |
| 2.2.7 Western Blot检测分析hMSH2的表达量 | 第28-32页 |
| 第3章 实验结果 | 第32-44页 |
| 3.1 CBMN-Cyt结果 | 第32-33页 |
| 3.2 双荧素酶验证结果分析 | 第33-36页 |
| 3.2.1 hMSH23’UTR野生型和突变型验证结果分析 | 第33-34页 |
| 3.2.2 靶向hMSH2基因的理论miRNA预测 | 第34-35页 |
| 3.2.3 双荧光素酶验证结果：靶向hMSH2基因的理论miRNA | 第35-36页 |
| 3.3 miR-21-5p加尾法RT-qPCR结果及质量控制 | 第36-38页 |
| 3.3.1 miR-21-5p加尾法RT-qPCR结果 | 第36-37页 |
| 3.3.2 miR-21-5p加尾法RT-qPCR质量控制 | 第37-38页 |
| 3.4 PDCD4、hMSH2、PCNA的RT-qPCR表达结果 | 第38-42页 |
| 3.4.1 hMSH2mRNA表达结果 | 第38-39页 |
| 3.4.2 PDCD4、PCNAmRNA表达结果 | 第39-41页 |
| 3.4.3 hMSH2、PDCD4、PCNART-qPCR质量控制 | 第41-42页 |
| 3.5 hMSH2蛋白水平表达结果 | 第42-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 A 自配试剂和溶液配方 | 第57-59页 |
| 附录 B 文献综述 | 第59-66页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文和研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
