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蛋白激酶MPK3/MPK6调控拟南芥响应低温胁迫的分子机制

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词第11-13页
第一章 文献综述第13-37页
    1.1 低温逆境的分类第13-17页
        1.1.1 冷害对植物的伤害第13-14页
        1.1.2 冻害对植物的伤害第14-15页
        1.1.3 植物抵御低温胁迫的生理基础第15-17页
    1.2 植物感受低温的机制第17-21页
        1.2.1 细胞膜流动性的变化第17页
        1.2.2 钙离子浓度变化与钙离子通道第17-19页
        1.2.3 双组分磷酸系统第19-20页
        1.2.4 其他可能的温度感受器第20-21页
    1.3 植物低温信号的转导途径第21-26页
        1.3.1 CBFs基因简述第21-22页
        1.3.2 CBF信号途径中的转录调控第22-23页
        1.3.3 CBF信号途径中的转录后调控第23-24页
        1.3.4 CBF信号途径中的翻译后调控第24-25页
        1.3.5 不依赖CBF的冷信号途径第25-26页
    1.4 MAPK级联信号系统第26-30页
        1.4.1 MAPKKKs第26-27页
        1.4.2 MAPKKs第27-29页
        1.4.3 MAPKs第29-30页
        1.4.4 MAPKs下游底物的多样性第30页
    1.5 MAPK在植物中的研究进展第30-36页
        1.5.1 MAPK参与调控植物生长发育过程第30-32页
        1.5.2 MAPK参与调控植物生物胁迫响应过程第32-34页
        1.5.3 MAPK参与调控植物非生物胁迫响应过程第34-36页
    1.6 本研究的目的和意义第36-37页
第二章 实验材料和方法第37-63页
    2.1 实验材料第37-39页
        2.1.1 植物材料第37页
        2.1.2 菌株材料第37页
        2.1.3 质粒和载体第37-38页
        2.1.4 主要载体构建方法第38-39页
    2.2 常用酶、试剂盒和化学药品第39-40页
    2.3 常用培养基、溶液的配制及试剂盒第40-47页
        2.3.1 常用培养基的配制第40-41页
        2.3.2 DNA小量提取及鉴定相关缓冲液第41页
        2.3.3 蛋白质染色和脱色液第41-42页
        2.3.4 蛋白质免疫印迹相关缓冲液第42-43页
        2.3.5 感受态制备所需缓冲液第43页
        2.3.6 烟草注射液第43页
        2.3.7 体外磷酸化相关缓冲液第43页
        2.3.8 抗生素贮存液第43-44页
        2.3.9 原核表达蛋白相关缓冲液第44页
        2.3.10 GUS酶活性测定相关缓冲液第44页
        2.3.11 原生质体转化相关缓冲液第44-45页
        2.3.12 ChIP实验相关缓冲液第45-47页
    2.4 主要实验仪器第47-48页
    2.5 实验方法第48-63页
        2.5.1 拟南芥种子灭菌及生长条件第48页
        2.5.2 烟草生长条件第48页
        2.5.3 冻害处理实验第48页
        2.5.4 相关基础实验和生化实验第48-63页
第三章 实验结果及分析第63-88页
    3.1 拟南芥ICE1互作蛋白的筛选及鉴定第63-66页
        3.1.1 ICE1互作蛋白的筛选第63-64页
        3.1.2 MPK3/MPK6与ICE1在体外直接发生相互作用第64-65页
        3.1.3 免疫共沉淀证明MPK3/MPK6与ICE1的相互作用第65-66页
    3.2 MPK3/MPK6负调控植物的抗冻能力第66-70页
    3.3 MPK3/MPK6调节CBFs及其下游基因表达第70-73页
    3.4 MPK3/MPK6位于ICE1的上游第73-76页
    3.5 MPK3/MPK6磷酸化ICE1第76-78页
        3.5.1 MPK3/MPK6可以在体外直接磷酸化ICE1第76-77页
        3.5.2 MPK3/MPK6调控ICE1在体内的磷酸化第77-78页
    3.6 MPK3/MPK6介导的ICE1磷酸化调控其蛋白功能第78-82页
        3.6.1 MPK3/MPK6介导的ICE1磷酸化调控其蛋白功能第78-81页
        3.6.2 MPK3/MPK6介导的ICE1磷酸化不影响其与MPK6的相互作用第81-82页
    3.7 MPK3/MPK6抑制ICE1的转录活性第82-83页
    3.8 MPK3/MPK6促进ICE1蛋白在低温下的降解第83-88页
        3.8.1 MPK3/MPK6促进ICE1蛋白的降解第83-85页
        3.8.2 MPK3/MPK6介导的ICE1磷酸化促进其蛋白在低温下的降解第85-87页
        3.8.3 MPK3/MPK6介导的ICE1磷酸化不影响其与HOS1的相互作用第87-88页
第四章 讨论与展望第88-93页
    4.1 MPK3和MPK6是CBF依赖的低温信号途径中重要的负调控因子第88-89页
    4.2 ICE1蛋白在低温下的磷酸化修饰具有多重功能第89-91页
    4.3 植物低温应答与气孔之间的关系第91-93页
第五章 结论第93-94页
参考文献第94-115页
附录第115-119页
致谢第119-121页
个人简介第121页

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