附录 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第10-12页 |
第一部分 PYGO2 SIRNA慢病毒载体制备、包装与滴度检测 | 第12-24页 |
1.材料 | 第12-16页 |
1.1 实验材料 | 第12-14页 |
1.2 试剂 | 第14-15页 |
1.3 主要仪器 | 第15页 |
1.4 主要试剂配制 | 第15-16页 |
2.方法 | 第16-22页 |
2.1 Pygo2 si RNA慢病毒载体制备 | 第16-19页 |
2.2 Pygo2 si RNA慢病毒载体包装与滴度检测 | 第19-22页 |
3.结果 | 第22-24页 |
3.1 靶点序列正确克隆 | 第22-23页 |
3.2 制备高滴度病毒 | 第23-24页 |
第二部分 PYGO2 SIRNA对U251细胞增殖与凋亡的影响及机制 | 第24-37页 |
1.材料 | 第24-26页 |
1.1 实验材料 | 第24页 |
1.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
1.3 主要试剂 | 第25页 |
1.4 主要试剂配制 | 第25-26页 |
2.方法 | 第26-33页 |
2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2 U251细胞感染 | 第27-28页 |
2.3 RT-PCR | 第28-30页 |
2.4 Western blot | 第30-32页 |
2.5 MTS增殖实验 | 第32页 |
2.6 Annexin V凋亡实验 | 第32-33页 |
2.7 统计学处理 | 第33页 |
3.结果 | 第33-37页 |
3.1 慢病毒表达载体具高感染率 | 第33页 |
3.2 慢病毒表达载体具高干扰率 | 第33-34页 |
3.3 Pygo2 si RNA抑制U251细胞增殖速率 | 第34-35页 |
3.4 Pygo2 si RNA诱导U251细胞凋亡 | 第35页 |
3.5 Pygo2 si RNA通过下调表观遗传学标志物H3K4me3抑制U251细胞增殖速率、诱导U251细胞凋亡 | 第35-37页 |
第三部分 初步探讨PYGO2 SIRNA对U251起源的肿瘤干细胞生物学特性的影响 | 第37-40页 |
1.材料 | 第37页 |
1.1 实验材料 | 第37页 |
1.2 试剂及仪器 | 第37页 |
2.方法 | 第37-38页 |
3.结果 | 第38-40页 |
3.1 U251细胞来源的胶质瘤干细胞培养体系的建立 | 第38-39页 |
3.2 Pygo2 m RNA在U251肿瘤干细胞中高表达 | 第39页 |
3.3 Pygo2 si RNA抑制肿瘤干细胞增殖 | 第39-40页 |
讨论 | 第40-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 | 第50-60页 |
参考文献 | 第56-60页 |
致谢 | 第60页 |