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HMGB1表达下调对胃癌细胞生物学功能的影响及初步分子机制探讨

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
前言第13-14页
文献回顾第14-24页
    1 胃癌的研究背景第14页
    2 HMGB1 研究背景第14-21页
    3 HMGB1 与肿瘤研究现状第21-22页
    4 HMGB1 与胃癌的研究现状第22页
    5 本实验的研究目的及意义第22-24页
实验一 HMGB1表达下调胃癌细胞系的建立及鉴定第24-37页
    1 材料第24-26页
        1.1 细胞系与质粒第24页
        1.2 主要试剂和仪器第24-26页
    2 方法第26-32页
        2.1 HMGB1基因RNAi慢病毒载体的构建第26-28页
        2.2 慢病毒小量包装及其滴度测定第28-29页
        2.3 胃癌细胞慢病毒感染第29-31页
        2.4 RT-PCR内源筛选有效靶点第31-32页
        2.5 Western blot实验检测HMGB1蛋白表达第32页
    3 结果第32-35页
        3.1 慢病毒干扰载体GV155HMGB1阳性克隆PCR鉴定第32-33页
        3.2 慢病毒干扰载体GV155HMGB1的DNA测序结果第33页
        3.3 慢病毒包装与病毒滴度测定第33-34页
        3.4 RT-PCR内源筛靶结果第34-35页
        3.5 Western blot验证结果第35页
    4 讨论第35-37页
实验二 HMGB1表达下调对胃癌细胞生物学功能的影响第37-46页
    1 材料第37-38页
        1.1 研究对象第37页
        1.2 主要试剂和仪器第37-38页
    2 方法第38-40页
        2.1 胃癌细胞慢病毒感染第38页
        2.2 MTT实验第38页
        2.3 Brd U掺入实验第38-39页
        2.4 克隆形成实验第39页
        2.5 凋亡实验(Annexin V-APC单染法)第39页
        2.6 细胞周期检测第39-40页
        2.7 Transwell实验第40页
        2.8 统计学处理第40页
    3 结果第40-45页
        3.1 HMGB1表达下调胃癌细胞的增殖显著降低第40-42页
        3.2 HMGB1表达下调胃癌细胞的克隆形率显著降低第42页
        3.3 HMGB1表达下调胃癌细胞的凋亡数增多第42-43页
        3.4 HMGB1表达下调胃癌细胞的S期细胞数明显减少第43-44页
        3.5 HMGB1表达下调胃癌细胞的迁移率降低第44-45页
    4 讨论第45-46页
实验三 HMGB1表达下调胃癌细胞Affymetrix芯片检测分析第46-57页
    1 实验材料第46-47页
        1.1 研究对象第46页
        1.2 主要试剂和仪器第46-47页
    2 方法第47-48页
        2.1 样本总RNA质检第47页
        2.2 3’IVT反应第47-48页
        2.3 杂交第48页
        2.4 洗染及扫描第48页
        2.5 标准化方法及软件第48页
        2.6 Western blot实验验证下游基因第48页
    3 结果第48-55页
        3.1 质检结果第48-49页
        3.2 有显著差异表现的基因数目及目的基因表现。第49-50页
        3.3 聚类图第50页
        3.4 火山图第50-51页
        3.5 散点图第51-52页
        3.6 Pathway分析第52-53页
        3.7 深入分析结果第53页
        3.8 下游基因Western blot验证第53-55页
    4 讨论第55-57页
小结第57-59页
参考文献第59-69页
个人简历和研究成果第69-70页
致谢第70页

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