| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| 1.白细胞介素-1 家族的研究进展 | 第10-17页 |
| 1.1 白细胞介素-1 的一般特征 | 第10-11页 |
| 1.2 鱼类白细胞介素-1β | 第11-13页 |
| 1.3 鱼类白细胞介素-18 | 第13页 |
| 1.4 其他白细胞介素-1 家族成员 | 第13-14页 |
| 1.5 白细胞介素-1 的生物学作用 | 第14-15页 |
| 1.6 白细胞介素-1 受体 | 第15-16页 |
| 1.7 白细胞介素-1 和疾病的关系 | 第16-17页 |
| 1.8 佐剂 | 第17页 |
| 2.锦鲤疱疹病毒的简介 | 第17-21页 |
| 2.1 分类和命名 | 第18页 |
| 2.2 CyHV-3 形态结构和理化特性 | 第18页 |
| 2.3 国内外流行现状 | 第18页 |
| 2.4 临床表现及组织病理学 | 第18-19页 |
| 2.5 分子生物学特征 | 第19页 |
| 2.6 功能基因 | 第19页 |
| 2.7 感染途径 | 第19-20页 |
| 2.8 检测方法研究进展 | 第20-21页 |
| 3.鱼类核酸疫苗 | 第21-22页 |
| 3.1 核酸疫苗的免疫途径 | 第22页 |
| 4.本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 pIRES25IL-1β 和pIRES81IL-1β 真核表达质粒的构建 | 第24-43页 |
| 1.材料 | 第24-25页 |
| 1.1 实验动物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.方法 | 第25-33页 |
| 2.1 IL-1β基因的引物设计 | 第25页 |
| 2.2 鲤鱼组织总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.3 反转录反应 | 第26页 |
| 2.4 IL-1β-25和IL-1β-81基因的扩增 | 第26页 |
| 2.5 IL-1β-25和IL-1β-81基因的克隆和鉴定 | 第26-28页 |
| 2.6 pIRES-ORF25-IL-1β-25真核表达重组质粒的构建和鉴定 | 第28-30页 |
| 2.7 pIRES-ORF81-IL-1β-81真核表达重组质粒的构建和鉴定 | 第30-31页 |
| 2.8 重组质粒在KF-1 细胞中的表达 | 第31-33页 |
| 3.结果 | 第33-40页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第33-34页 |
| 3.2 目的基因PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.3 重组质粒pMD18-T- IL-1β-25和pMD18-T- IL-1β-81的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.4 重组质粒pIRES-ORF25-IL-1β-25和pIRES-ORF81-IL-1β-81鉴定 | 第36-39页 |
| 3.5 RT-PCR检测重组质粒的转染情况 | 第39页 |
| 3.6 western-blot鉴定蛋白表达结果 | 第39-40页 |
| 4.讨论 | 第40-41页 |
| 4.1 目的基因的选择 | 第40-41页 |
| 4.2 真核表达载体的选择 | 第41页 |
| 4.3 重组质粒的表达 | 第41页 |
| 5.小结 | 第41-43页 |
| 第三章 重组质粒pIRES25IL-1β 和pIRES81IL-1β 在鲤鱼体内的免疫反应 | 第43-53页 |
| 1.材料 | 第43页 |
| 1.1 实验动物 | 第43页 |
| 1.2 质粒 | 第43页 |
| 1.3 主要试剂 | 第43页 |
| 1.4 主要仪器 | 第43页 |
| 2.方法 | 第43-46页 |
| 2.1 质粒的大量提取 | 第43-44页 |
| 2.2 实验动物的选取 | 第44页 |
| 2.3 重组质粒免疫鲤鱼 | 第44-45页 |
| 2.4 二抗的制备 | 第45页 |
| 2.5 重组表达质粒诱导鲤鱼的免疫效果检测 | 第45-46页 |
| 3.结果 | 第46-51页 |
| 3.1 实验鲤鱼的PCR检测 | 第46页 |
| 3.2 ELISA对鲤鱼血清中抗体水平的检测 | 第46-51页 |
| 4.讨论 | 第51-52页 |
| 5.小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
