| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 鱼类性别研究进展 | 第8-10页 |
| 1.2 DKKs家族基因的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.3 DKKL-1 基因 | 第13页 |
| 1.4 半滑舌鳎研究进展 | 第13-14页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 第2章 半滑舌鳎的性别鉴定 | 第16-22页 |
| 2.1 实验材料及仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第16页 |
| 2.1.2 实验器材及试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-19页 |
| 2.2.1 生理性别的鉴定 | 第17-18页 |
| 2.2.2 遗传性别的鉴定 | 第18-19页 |
| 2.3 结果分析 | 第19-21页 |
| 2.3.1 遗传性别结果 | 第19页 |
| 2.3.2 生理性别结果 | 第19-21页 |
| 2.4 讨论 | 第21-22页 |
| 第3章DKKL-1 的克隆及表达分析 | 第22-47页 |
| 3.1.实验材料及仪器设备 | 第22-24页 |
| 3.1.1 样品采集 | 第22页 |
| 3.1.2 实验器材与试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 所用分析软件 | 第23页 |
| 3.1.4 所用引物 | 第23-24页 |
| 3.2 DNA和RNA的提取及cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 3.2.1 DNA的提取参见第二章 | 第24页 |
| 3.2.2 总RNA的提取（Trizol法） | 第24-25页 |
| 3.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第25页 |
| 3.3 DKKL-1cDNA及DNA克隆 | 第25-34页 |
| 3.3.1 目的片段的扩增 | 第25-26页 |
| 3.3.2 PCR扩增产物的回收 | 第26-27页 |
| 3.3.3 目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第27页 |
| 3.3.4 连接产物的转化 | 第27页 |
| 3.3.5 重组质粒的鉴定及测序 | 第27-28页 |
| 3.3.6 DKKL-1 的末端扩增 | 第28-33页 |
| 3.3.7 序列分析和进化树构建 | 第33-34页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 3.5 结果分析 | 第35-45页 |
| 3.5.1 DKKL-1 的cDNA序列分析 | 第35-39页 |
| 3.5.2 系统发育分析 | 第39-43页 |
| 3.5.3 实时荧光定量表达分析 | 第43-45页 |
| 3.5.3.1 DKKL-1 基因在不同组织中的表达模式分析 | 第43-44页 |
| 3.5.3.2 DKKL-1 基因在半滑舌鳎不同发育时期的雌雄性腺的表达 | 第44-45页 |
| 3.6 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60页 |