摘要 | 第2-3页 |
ABSTRACT | 第3-4页 |
引言 | 第7-9页 |
第1章 实验材料 | 第9-11页 |
1.1 实验标本 | 第9页 |
1.2 主要仪器、设备 | 第9-10页 |
1.3 主要试剂 | 第10-11页 |
第2章 实验方法 | 第11-20页 |
2.1 HepG2细胞培养 | 第11-12页 |
2.1.1细胞复苏 | 第11页 |
2.1.2细胞传代 | 第11页 |
2.1.3细胞冻存 | 第11-12页 |
2.2 TRAIL重组表达载体的构建 | 第12-16页 |
2.2.1 引物设计与合成 | 第12页 |
2.2.2 引物退火 | 第12页 |
2.2.3 目的基因的克隆和扩增 | 第12-13页 |
2.2.4 PCR产物双酶切 | 第13-14页 |
2.2.5 将TRAIL基因片段连接入载体 | 第14页 |
2.2.6 DH5α制备 | 第14页 |
2.2.7 转化 | 第14-15页 |
2.2.8 重组质粒鉴定 | 第15-16页 |
2.2.9 慢病毒感染HepG2细胞 | 第16页 |
2.3 Western blotting检测慢病毒感染HepG2后TRAIL蛋白的表达 | 第16-18页 |
2.4 化疗药物干预TRAIL- HepG2细胞 | 第18页 |
2.5 MTT检测细胞的增殖 | 第18页 |
2.6 流式细胞术检测细胞的凋亡率 | 第18-19页 |
2.7 统计学方法 | 第19-20页 |
第3章 实验结果 | 第20-24页 |
3.1 显微镜下 Hep G2 细胞 | 第20页 |
3.2 携带TRAIL基因的慢病毒穿梭载体的构建 | 第20页 |
3.3 最佳MOI值慢病毒感染Hep G2 | 第20-21页 |
3.4 Hep G2细胞TRAIL蛋白的表达 | 第21-22页 |
3.5 MTT检测细胞的增殖 | 第22页 |
3.6 流式细胞术检测细胞凋亡作用 | 第22-24页 |
第4章 讨论 | 第24-26页 |
第5章 结论 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-32页 |
文献综述 | 第32-44页 |
参考文献 | 第38-44页 |
英文缩写词表 | 第44-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |