| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 可变剪接的基本机制 | 第12-15页 |
| 1.2 SMA | 第15-16页 |
| 1.3 SMN 基因及其可变剪接 | 第16-18页 |
| 1.4 Sam68 剪接因子 | 第18-20页 |
| 1.5 mini-AS system 的构建 | 第20-22页 |
| 2 实验材料、器材 | 第22-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-29页 |
| 2.1.1 实验菌株、酶和载体 | 第22-24页 |
| 2.1.2 实验室所用细胞 | 第24页 |
| 2.1.3 试验中用到主要实验试剂、药品 | 第24-25页 |
| 2.1.4 实验所需的主要溶液 | 第25-29页 |
| 2.2 实验室器材 | 第29-30页 |
| 2.3 主要分子生物分析软件 | 第30页 |
| 2.4 生物信息学相关网站 | 第30-31页 |
| 3 实验方法 | 第31-47页 |
| 3.1 重复组载体 pcDNA3.1-SMN 的构建 | 第31-39页 |
| 3.1.1 人类全血基因组 DNA 的提取 | 第31-34页 |
| 3.1.2 SMN-minigene 的获取 | 第34-36页 |
| 3.1.3 大肠杆菌 DHα感受态细胞的制备 | 第36页 |
| 3.1.4 pcDNA3.1（+/-）的提取、纯化与双酶切 | 第36-38页 |
| 3.1.5 构建 pcDNA3.1-SMN 重组载体 | 第38-39页 |
| 3.2 重组载体 pEGFP-C1-Sam68 的构建 | 第39-44页 |
| 3.2.1 人类全血 RNA 的提取 | 第39-40页 |
| 3.2.2 RT-PCR 扩增 Sam68 基因片段 | 第40-42页 |
| 3.2.3 Sam68 基因片段的双酶切及纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.4 pEGFP-C1 的双酶切和纯化 | 第43页 |
| 3.2.5 构建 pEGFP-C1- Sam68 重组载体 | 第43-44页 |
| 3.3 重组载体转染 293T 细胞 | 第44-46页 |
| 3.3.12 93T 细胞的培养 | 第44-45页 |
| 3.3.2 细胞转染 | 第45-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 4 结果与分析 | 第47-58页 |
| 4.1 构建重组载体 pcDNA3.1-SMN | 第47-52页 |
| 4.1.1 提取的人类全基因组 DNA | 第47-48页 |
| 4.1.2 SMN（primer1）基因片段的 PCR 扩增及产物纯化 | 第48-50页 |
| 4.1.3 pcDNA3.1（+/-）的提取及其双酶切 | 第50-51页 |
| 4.1.4 重组载体 pcDNA3.1-SMN 的提取及其双酶切验证 | 第51-52页 |
| 4.2 SMN 基因片段（primer2）的 PCR 扩增及其产物纯化 | 第52-53页 |
| 4.3 构建重组载体 pEGFP-C1-Sam68 | 第53-56页 |
| 4.3.1 提取的人类全血 RNA | 第53-55页 |
| 4.3.2 反转录得到 cDNA | 第55-56页 |
| 4.4 培养的 293T 细胞 | 第56-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 在学研究成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
