摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 植物富含甘氨酸/脯氨酸蛋白的研究进展 | 第9-16页 |
1.1.1 富含甘氨酸蛋白基因(GRP)的研究进展 | 第10-12页 |
1.1.2 富含脯氨酸蛋白基因(PRP)的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.3 富含甘氨酸和脯氨酸蛋白基因(GPRP)的研究进展 | 第14-16页 |
1.2 RNAi干扰技术及其应用 | 第16页 |
1.3 CRISPR敲除技术及其应用 | 第16-18页 |
1.4 本研究的主要内容、目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 材料和方法 | 第19-24页 |
2.1 实验仪器及材料 | 第19页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 质粒和菌种 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 水稻OsGPRPs启动子顺式作用元件分析 | 第19页 |
2.2.2 OsGPRP基因表达分析 | 第19-21页 |
2.2.3 OsGPRPs敲除载体和RNAi载体的构建 | 第21-22页 |
2.2.4 遗传转化和阳性植株的筛选 | 第22页 |
2.2.5 突变体鉴定 | 第22-23页 |
2.2.6 突变体的表型鉴定 | 第23页 |
2.2.7 数据分析 | 第23-24页 |
第三章 结果与分析 | 第24-40页 |
3.1 OsGPRPs基因的顺式作用元件分析 | 第24-26页 |
3.2 OsGPRPs在水稻中的表达模式 | 第26-27页 |
3.3 OsGPRPs-CRISPR转基因水稻的创建 | 第27-32页 |
3.3.1 OsGPRPs-CRISPR敲除载体的构建和遗传转化 | 第27-29页 |
3.3.2 OsGPRP3-CRISPR单基因敲除转基因植物的鉴定 | 第29-31页 |
3.3.3 OsGPRPs-CRISP三基因敲除转基因植物的鉴定 | 第31-32页 |
3.4 OsGPRP3-CRISPR单基因敲除纯合植株表型鉴定 | 第32-36页 |
3.4.1 OsGPRP3-CRISPR单基因敲除植株穗长和千粒重比较 | 第32-33页 |
3.4.2 OsGPRP3-CRISPR单基因敲除植株种子的萌发率测定 | 第33-34页 |
3.4.3 OsGPRP3-CRISPR单基因敲除植株对干旱胁迫的响应 | 第34-36页 |
3.5 OsGPRPs-RNAi转基因植株的获取与鉴定 | 第36-40页 |
3.5.1 载体构建和遗传转化 | 第36-37页 |
3.5.2 水稻OsGPRPs-RNAi材料的表达分析 | 第37-40页 |
第四章 讨论与展望 | 第40-43页 |
4.1 水稻OsGPRP基因的启动子顺式作用原件分析 | 第40-41页 |
4.2 OsGPRP家族基因的表达模式与功能分析 | 第41-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-52页 |