摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略语 | 第9-13页 |
第一部分 :具核梭杆菌感染Tca8113舌鳞癌细胞发生DNA损伤,加速细胞周期,促进细胞增殖 | 第13-30页 |
1 前言 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-21页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第15-16页 |
2.1.1 仪器设备 | 第15页 |
2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-20页 |
2.2.1 Tca8113舌鳞癌细胞培养 | 第16-17页 |
2.2.2 具核梭杆菌细菌培养 | 第17页 |
2.2.3 Western blot检测γH2AX蛋白水平,构建F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞DNA损伤模型 | 第17-19页 |
2.2.4 免疫荧光验证Tca8113舌鳞癌细胞DNA损伤 | 第19页 |
2.2.5 CCK-8检测Tca8113舌鳞癌细胞增殖能力 | 第19页 |
2.2.6 流式细胞仪检测Tca8113舌鳞癌细胞周期变化 | 第19-20页 |
2.3 统计学分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-27页 |
3.1 成功构建F.nucleatum感染舌鳞癌细胞发生DNA损伤模型 | 第21-23页 |
3.2 F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞发生DNA损伤并促进细胞增殖 | 第23-24页 |
3.3 F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞发生DNA损伤并加速细胞G1期,阻滞细胞于S期 | 第24-27页 |
4 讨论 | 第27-29页 |
5 结论 | 第29-30页 |
第二部分 :具核梭杆菌通过Ku70/p53途径促进Tca8113舌鳞癌细胞增殖 | 第30-47页 |
1 前言 | 第30-33页 |
2 材料与方法 | 第33-39页 |
2.1 主要试剂与仪器 | 第33-34页 |
2.1.1 仪器设备 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-38页 |
2.2.1 Real-time PCR检测Ku70、wildp53、p27mRNA表达水平 | 第34-35页 |
2.2.2 Western blot检测Ku70和mutantp53蛋白表达水平 | 第35页 |
2.2.3 质粒转染Ku70,检测F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞24h,细胞增殖能力和wildp53表达变化 | 第35-38页 |
2.3 统计学分析 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-44页 |
3.1 F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞DNA损伤并持续下调Ku70表达 | 第39-40页 |
3.2 F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞DNA损伤并下调抑癌因子wildp53,p27表达,促癌因子mutantp53表达增高 | 第40-41页 |
3.3 质粒转染修复因子Ku70,检测细胞增殖能力变化并验证通路 | 第41-44页 |
3.3.1 成功转染过表达Ku | 第41-42页 |
3.3.2 通过转染过表达Ku70,F.nucleatum感染24h时,细胞增殖能力由转染前增强转为抑制,并进一步验证通路,检测下游抑癌因子wild p53 mRNA表达变化 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
本研究创新性的自我评价 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
综述 | 第53-60页 |
参考文献 | 第56-60页 |
攻读学位期间所取得的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
个人简历 | 第62页 |