| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 论文综述 | 第15-27页 |
| 综述一 布鲁氏菌病疫苗研究进展 | 第15-20页 |
| 1 布鲁氏菌概述 | 第15-16页 |
| 1.1 布鲁氏菌病病原 | 第15页 |
| 1.2 布鲁氏菌病临床特征 | 第15-16页 |
| 1.3 布鲁氏菌病的防控 | 第16页 |
| 2 布鲁氏菌病疫苗 | 第16-18页 |
| 2.1 兽用布鲁氏菌病疫苗 | 第16-17页 |
| 2.2 人用布鲁氏菌病疫苗 | 第17-18页 |
| 3.新型疫苗研究现状 | 第18-19页 |
| 3.1 重组蛋白疫苗的研究 | 第18页 |
| 3.2 DNA疫苗的研究 | 第18-19页 |
| 3.3 载体疫苗的研究 | 第19页 |
| 展望 | 第19-20页 |
| 综述二 革兰氏阴性菌外膜囊泡(OMVs)研究进展 | 第20-27页 |
| 1.OMVs产生及类型 | 第20-22页 |
| 1.1 OMVs的产生 | 第20页 |
| 1.2 OMVs的类型 | 第20-22页 |
| 1.3 OMVs不同类型的差异 | 第22页 |
| 2.OMVs诱导的免疫应答及机制 | 第22-23页 |
| 2.1 固有免疫反应 | 第22-23页 |
| 2.2 获得性免疫 | 第23页 |
| 3.OMVs作为疫苗的应用 | 第23-24页 |
| 3.1 天然产生的OMVs疫苗 | 第23-24页 |
| 3.2 异源OMVs疫苗(OMVs作为抗原递呈载体) | 第24页 |
| 3.3 OMVs作为疫苗佐剂 | 第24页 |
| 4.目前在OMVs疫苗中使用的佐剂 | 第24-25页 |
| 5.布鲁氏菌OMVs研究进展 | 第25页 |
| 展望 | 第25-27页 |
| 第二章 实验部分 | 第27-76页 |
| 实验一 布鲁氏菌新疆流行株043外膜囊泡(OMVs)的提取及鉴定 | 第27-40页 |
| 1.材料和方法 | 第28-33页 |
| 1.1 材料 | 第28-29页 |
| 1.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.实验结果 | 第33-38页 |
| 2.1 两种方法提取的布鲁氏菌043的OMVs形态比较 | 第33-34页 |
| 2.2 OMVs内含蛋白初步鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3 OMVs刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7后细胞因子检测 | 第35-37页 |
| 2.4 OMVs对小鼠巨噬细胞RAW264.7的布鲁氏菌粘附和内化的影响 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 3.1 OMVs形态鉴定 | 第38页 |
| 3.2 OMVs对RAW264.7细胞因子表达的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 OMVs对小鼠巨噬细胞RAW264.7的布鲁氏菌粘附和内化的影响 | 第39-40页 |
| 实验二 布鲁氏菌外膜囊泡相关蛋白的制备及间接ELISA方法的建立 | 第40-53页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| 1.1 材料 | 第41页 |
| 1.2 方法 | 第41-44页 |
| 2.结果 | 第44-51页 |
| 2.1 布鲁氏菌043外膜蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第44页 |
| 2.2 重组外膜蛋白的表达纯化 | 第44-47页 |
| 2.3 WesternBlot检测重组蛋白 | 第47页 |
| 2.4 间接ELISA最佳反应条件的选择 | 第47-50页 |
| 2.5 临界值的确定 | 第50页 |
| 2.6 特异性实验 | 第50-51页 |
| 3.讨论 | 第51-53页 |
| 3.1 外膜囊泡相关蛋白制备 | 第51-52页 |
| 3.2 间接ELISA方法的建立及抗原筛选 | 第52-53页 |
| 实验三 布鲁氏菌外膜囊泡免疫原性评价 | 第53-76页 |
| 1 材料与方法 | 第54-57页 |
| 1.1 材料 | 第54页 |
| 1.2 方法 | 第54-57页 |
| 2.实验结果 | 第57-73页 |
| 2.1 纳米佐剂(LDH)吸附疫苗定量 | 第57-58页 |
| 2.2 间接ELISA检测免疫后小鼠特异性抗体 | 第58-59页 |
| 2.3 体液免疫水平检测 | 第59-62页 |
| 2.4 免疫后小鼠细胞免疫水平评价 | 第62-63页 |
| 2.5 T淋巴细胞亚群分类实验 | 第63-66页 |
| 2.6 布鲁氏菌感染小鼠组织病理学切片观察 | 第66-71页 |
| 2.7 免疫攻毒后小鼠脾脏指数的测定 | 第71-72页 |
| 2.8 免疫攻毒后小鼠脾脏CFU计数 | 第72-73页 |
| 3.讨论 | 第73-76页 |
| 3.1 纳米佐剂(LDH)吸附疫苗定量 | 第73-74页 |
| 3.2 体液免疫水平分析 | 第74页 |
| 3.3 细胞免疫水平分析 | 第74-75页 |
| 3.4 保护力评价 | 第75-76页 |
| 第三章 全文总结 | 第76-77页 |
| 创新点 | 第77-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 作者简介 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 附件 | 第91页 |
