| 摘要 | 第4-7页 |
| Summary | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第11-32页 |
| 1.1 烟草及烟碱研究概况 | 第11-19页 |
| 1.1.1 烟碱的生物合成 | 第11-14页 |
| 1.1.2 影响烟叶烟碱含量的因素 | 第14-19页 |
| 1.1.2.1 遗传因素 | 第15-16页 |
| 1.1.2.2 生态因紊 | 第16-17页 |
| 1.1.2.3 栽培因素 | 第17-19页 |
| 1.2 作物杂种优势研究利用 | 第19-23页 |
| 1.2.1 作物杂种优势的普遍性和多样性 | 第19-20页 |
| 1.2.2 作物杂种优势的遗传机制 | 第20-23页 |
| 1.2.2.1 显性假说 | 第20-21页 |
| 1.2.2.2 超显性假说 | 第21-22页 |
| 1.2.2.3 上位性效应 | 第22-23页 |
| 1.3 作物杂种优势研究方法与技术 | 第23-29页 |
| 1.3.1 QTLs定位方法 | 第23-24页 |
| 1.3.2 mRNA差异显示技术 | 第24页 |
| 1.3.3 Real-time PCR技术 | 第24-29页 |
| 1.3.3.1 Real-time PCR的原理 | 第25-26页 |
| 1.3.3.2 Real-time PCR的荧光化学 | 第26-27页 |
| 1.3.3.3 Real-time PCR的定量方法 | 第27-28页 |
| 1.3.3.4 Real-time PCR技术的应用 | 第28-29页 |
| 1.4 烟草杂种优势研究利用 | 第29-31页 |
| 1.4.1 烟草配合力（combining ability）的研究 | 第29-30页 |
| 1.4.2 基因差异表达（gene differential expression）与杂种优势关系 | 第30-31页 |
| 1.5 研究的目的意义 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-40页 |
| 2.1 材料及来源 | 第32-34页 |
| 2.2 技术路线 | 第34页 |
| 2.3 田间试验方法与技术 | 第34-35页 |
| 2.4 测定项目及方法 | 第35-40页 |
| 2.4.1 烟碱含量的测定 | 第35-36页 |
| 2.4.1.1 样品的制备 | 第35页 |
| 2.4.1.2 烟碱的测定方法 | 第35-36页 |
| 2.4.2 烟碱生物合成途径关键酶基因的Real-time PCR分析 | 第36-39页 |
| 2.4.2.1 RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.4.2.2 RNA的纯度和完整性检测 | 第37页 |
| 2.4.2.3 cDNA单链合成 | 第37-38页 |
| 2.4.2.4 引物设计 | 第38页 |
| 2.4.2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第38-39页 |
| 2.4.3 统计方法 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-61页 |
| 3.1 烟叶烟碱含量性状的遗传分析 | 第40-47页 |
| 3.1.1 亲本间烟碱含量差异分析 | 第40-41页 |
| 3.1.2 各杂交组合烟碱含量性状的杂种优势表现 | 第41-44页 |
| 3.1.3 配合力分析 | 第44-47页 |
| 3.1.3.1 不同组合间烟碱含量配合力方差分析 | 第44页 |
| 3.1.3.2 一般配合力效应值（GCA）分析 | 第44-45页 |
| 3.1.3.3 特殊配合力效应值（SCA）分析 | 第45-47页 |
| 3.1.3.4 遗传力分析 | 第47页 |
| 3.2 烟碱含量性状的动态变化 | 第47-50页 |
| 3.2.1 亲本材料间烟叶烟碱含量的动态变化分析 | 第47-49页 |
| 3.2.2 不同时期烟叶烟碱含量相关性分析 | 第49-50页 |
| 3.3 烟碱性状杂种优势的基因差异表达分析 | 第50-61页 |
| 3.3.1 RNA及cDNA的检测 | 第50-52页 |
| 3.3.1.1 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性和质量 | 第51页 |
| 3.3.1.2 紫外分光光度计检测RNA纯度和浓度 | 第51页 |
| 3.3.1.3 cDNA单链的检测 | 第51-52页 |
| 3.3.2 烟碱合成关键酶基因在不同杂种优势组合中的表达分析 | 第52-57页 |
| 3.3.2.1 烟碱合成关键酶基因在正向超亲优势组合中的表达分析 | 第52-54页 |
| 3.3.2.2 烟碱合成关键酶基因在负向超亲优势组合中的表达分析 | 第54-55页 |
| 3.3.2.3 烟碱合成关键酶基因在中亲优势组合中的表达分析 | 第55-57页 |
| 3.3.3 烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱性状、杂种优势的相关性分析57 | 第57-61页 |
| 3.3.3.1 移栽后 56d烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱含量、杂种优势的相关性分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3.2 移栽后 70d烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱含量、杂种优势的相关性分析 | 第58页 |
| 3.3.3.3 移栽后 77d烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱含量、杂种优势的相关性分析 | 第58-59页 |
| 3.3.3.4 移栽后 84d烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱含量、杂种优势的相关性分析 | 第59-60页 |
| 3.3.3.5 移栽后 91d烟碱合成关键酶基因表达量与烟碱含量、杂种优势的相关性分析 | 第60-61页 |
| 4 小结与讨论 | 第61-66页 |
| 4.1 烟草烟碱含量性状的遗传特点及杂种优势分析 | 第61页 |
| 4.2 烟碱含量的动态变化规律 | 第61-62页 |
| 4.3 不同优势组合各时期基因差异表达的变化趋势 | 第62-63页 |
| 4.4 基因差异表达与杂种优势的相关性 | 第63页 |
| 4.5 烟碱生物合成途径相关酶基因检测方法和技术 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
