| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 大豆及大豆花叶病毒(SMV) | 第12-13页 |
| 1.2 模式植物本氏烟草及烟草花叶病毒(TMV) | 第13-14页 |
| 1.3 转录组学在大豆中的应用 | 第14-16页 |
| 1.3.1 转录组学及转录组测序技术(RNA-seq) | 第14页 |
| 1.3.2 RNA-seq与基因表达水平分析 | 第14-15页 |
| 1.3.3 大豆转录组研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 植物的防御反应 | 第16-17页 |
| 1.5 植物的抗性基因 | 第17-19页 |
| 1.5.1 NBS-LRR类抗性基因 | 第17页 |
| 1.5.2 NBS-LRR蛋白的结构特征 | 第17-19页 |
| 1.6 水杨酸与植物抗病的关系 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第21-22页 |
| 2.1.3 各种生化试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 实验材料的处理 | 第23-24页 |
| 2.2.2 测序流程 | 第24-25页 |
| 2.2.3 测序数据处理 | 第25-26页 |
| 2.2.4 Trizon法提取植物总RNA | 第26页 |
| 2.2.5 cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.2.6 利用qRT-PCR检测基因表达量 | 第27-28页 |
| 2.2.7 CTAB法提取大豆基因组DNA | 第28页 |
| 2.2.8 载体改造 | 第28页 |
| 2.2.9 线性载体胶回收 | 第28-29页 |
| 2.2.10 目标基因扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.11 In-Fusion克隆构建表达载体 | 第30页 |
| 2.2.12 农杆菌转化实验及叶片侵染 | 第30-31页 |
| 2.2.13 NorthernBlot | 第31-34页 |
| 2.2.14 紫外分光光度法测取叶片中内源性SA浓度 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第35-56页 |
| 3.1 大豆转录组测序和质量评估 | 第35-38页 |
| 3.2 差异表达基因(DEG)的分析 | 第38-39页 |
| 3.3 通过KEGG分析差异表达基因 | 第39-41页 |
| 3.4 对SMV响应的NBS-LRR类基因的表达分析 | 第41-44页 |
| 3.5 大豆NBS-LRR类基因的克隆 | 第44-46页 |
| 3.6 pBI121线性载体的制备 | 第46页 |
| 3.7 pBI121-NL(X)过表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.8 NL(G12g132200)对TMV具有抗性 | 第47-49页 |
| 3.9 NorthernBlot实验证实NL(G12g132200)基因的过表达抑制TMV的扩增 | 第49-50页 |
| 3.10 NL(G12g132200)对SMV具有抗性 | 第50-52页 |
| 3.11 NL(G12g132200)的结构域预测 | 第52-53页 |
| 3.12 植物激素水杨酸在SMV侵染后对大豆NBS-LRR类基因表达量的影响 | 第53-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-83页 |
| 附录1 常用培养基及试剂的配制 | 第62-65页 |
| 附录2 本论文所用引物 | 第65-67页 |
| 附录3 大豆319条NBS-LRR类基因具体名称及QTL分部情况 | 第67-77页 |
| 附录4 大豆Wm81.a1.v1.1与Wm82.a2.v1版命名方式对照表 | 第77-82页 |
| 附录5 对SMV侵染后表达量发生变化的NBS-LRR类基因 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
