| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-28页 |
| 1.1 非编码 RNA | 第11-16页 |
| 1.1.1 非编码 RNA 的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 长非编码 RNA 及其功能 | 第12-14页 |
| 1.1.3 长非编码 RNA 对基因表达调控的机制 | 第14-16页 |
| 1.1.4 长非编码 RNA 与疾病 | 第16页 |
| 1.2 长非编码 RNA 与印记基因簇 | 第16-17页 |
| 1.3 Dlk1-Dio3 印记簇的长非编码 RNA | 第17-19页 |
| 1.3.1 Dlk1-Dio3 印记簇的结构 | 第17-18页 |
| 1.3.2 Dlk1-Dio3 印记簇的调控 | 第18-19页 |
| 1.3.3 Dlk1-Dio3 印记簇的长非编码 RNA | 第19页 |
| 1.4 母本表达的长非编码 RNA Gtl2 | 第19-22页 |
| 1.4.1 Gtl2 基因的特征 | 第19页 |
| 1.4.2 Gtl2 基因的表达模式 | 第19-20页 |
| 1.4.3 Gtl2 在小鼠发育中的功能 | 第20-21页 |
| 1.4.4 Gtl2 人源转录本 Meg3 的功能研究 | 第21-22页 |
| 1.5 Gtl2 基因的表达调控 | 第22-25页 |
| 1.5.1 DNA 甲基化调控 | 第22-24页 |
| 1.5.2 组蛋白修饰调控 | 第24页 |
| 1.5.3 干细胞多能性因子的调控 | 第24-25页 |
| 1.6 研究意义和主要研究内容 | 第25-28页 |
| 1.6.1 本课题研究意义 | 第25-26页 |
| 1.6.2 本课题的主要研究内容 | 第26-27页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第27-28页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第28-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验动物，细胞系，菌株及质粒载体 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-39页 |
| 2.2.1 小鼠着床前各时期胚胎的获取 | 第30页 |
| 2.2.2 着床前胚胎总 RNA 的提取、逆转录及实时定量分析 | 第30-31页 |
| 2.2.3 RNA 探针的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.4 着床前全胚胎荧光原位杂交 | 第32-33页 |
| 2.2.5 甲基化分析 | 第33-34页 |
| 2.2.6 Micro ChIP 实验分析 | 第34-37页 |
| 2.2.7 慢病毒载体的构建、包装及滴度检测 | 第37-38页 |
| 2.2.8 小鼠着床前胚胎体外培养 | 第38页 |
| 2.2.9 慢病毒受精卵透明带下注射实验 | 第38页 |
| 2.2.10 Outgrowth 实验 | 第38-39页 |
| 第3章 lncRNA Gtl2 在小鼠着床前胚胎的表达模式 | 第39-48页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 lncRNA Gtl2 早期胚胎的动态分布和亚细胞定位 | 第39-42页 |
| 3.2.1 桑椹胚时期 lncRNA Gtl2 的分布和亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 3.2.2 早期囊胚中 lncRNA Gtl2 的分布和亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 3.3 Rian、Mirg 在早期胚胎中的动态分布和亚细胞定位 | 第42-45页 |
| 3.3.1 桑椹胚时期 lncRNA Rian 和 Mirg 的分布和亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 3.3.2 早期囊胚中 lncRNA Rian 和 Mirg 的分布和亚细胞定位 | 第43-45页 |
| 3.4 LncRNA Gtl2 在桑椹胚时期印记模式 | 第45-46页 |
| 3.4.1 Gtl2 基因在 ICR 和 B6 小鼠中的 SNP 分析 | 第45-46页 |
| 3.4.2 Gtl2 在桑椹胚时期的印记分析 | 第46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 3.6 本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 lncRNAs Gtl2 的表观调控研究 | 第48-52页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 着床前胚胎的组蛋白修饰检测 | 第48-51页 |
| 4.2.1 ChIP 检测引物设计 | 第48-49页 |
| 4.2.2 8 细胞组蛋白修饰检测 | 第49页 |
| 4.2.3 桑椹胚组蛋白修饰检测 | 第49-50页 |
| 4.2.4 囊胚组蛋白修饰检测 | 第50-51页 |
| 4.3 讨论 | 第51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 干细胞多能性因子的调控 | 第52-58页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 慢病毒载体的构建、包装及滴度检测 | 第52-54页 |
| 5.2.1 载体质粒的构建和包装 | 第52-53页 |
| 5.2.2 病毒滴度检测 | 第53-54页 |
| 5.3 干细胞多能因子的调控 | 第54-56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-57页 |
| 5.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 第6章 Gtl2 在早期胚胎发育中的功能研究 | 第58-65页 |
| 6.1 引言 | 第58页 |
| 6.2 Gtl2 对胚胎发育的影响 | 第58-60页 |
| 6.2.1 Gtl2 干扰效率检测 | 第58-60页 |
| 6.2.2 Gtl2 干扰后对囊胚发育率的影响 | 第60页 |
| 6.3 Gtl2 对囊胚体外生长能力的影响 | 第60-62页 |
| 6.3.1 囊胚体外生长实验 | 第60-61页 |
| 6.3.2 Gtl2 干扰后对干细胞多能性因子的影响 | 第61页 |
| 6.3.3 Gtl2 干扰对分化标志基因表达的影响 | 第61-62页 |
| 6.4 Gtl2 干扰后对同簇基因表达的影响 | 第62-63页 |
| 6.5 讨论 | 第63-64页 |
| 6.6 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录Ⅰ | 第74-76页 |
| 附录Ⅱ | 第76-77页 |
| 附录Ⅲ | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
