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冷冻保存应激对牛MⅡ期卵母细胞表观遗传及其发育的影响

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文献综述第12-24页
    第一章 卵母细胞和胚胎冷冻第12-20页
        1.1 卵母细胞和胚胎的程序化冷冻第12-13页
            1.1.1 程序化冷冻的发展第12-13页
            1.1.2 程序化冷冻的方法第13页
        1.2 卵母细胞和胚胎的玻璃化冷冻第13-19页
            1.2.1 玻璃化冷冻的发现及实现条件第13-15页
            1.2.2 玻璃化冷冻的研究进展第15-18页
            1.2.3 玻璃化冷冻的现状及问题第18-19页
        1.3 程序化冷冻和玻璃化冷冻的比较第19-20页
    第二章 表观遗传修饰与胚胎发育第20-24页
        2.1 DNA 甲基化与胚胎发育第20-22页
        2.2 组蛋白修饰与胚胎发育第22页
        2.3 基因组印记与胚胎发育第22-24页
实验部分第24-49页
    第三章 卵母细胞玻璃化冷冻对表观遗传的影响第24-37页
        3.1 实验材料第24-25页
            3.1.1 试剂和仪器设备第24-25页
            3.1.2 试剂的配制第25页
        3.2 实验方法第25-28页
            3.2.1 卵母细胞的采集和体外成熟(IVM)第25-26页
            3.2.2 MⅡ卵的冷冻和解冻第26页
            3.2.3 卵母细胞的孤雌激活和胚胎培养第26页
            3.2.4 定量引物设计第26-27页
            3.2.5 胚胎的定量 PCR 检测第27页
            3.2.6 卵母细胞及胚胎的免疫荧光染色第27-28页
            3.2.7 荧光密度分析第28页
            3.2.8 数据的统计分析第28页
        3.3 实验结果第28-34页
            3.3.1 卵母细胞冷冻对 DNA 甲基化的影响第28-30页
            3.3.2 卵母细胞冷冻对 acH3K9 的影响第30-31页
            3.3.3 卵母细胞冷冻对 H3K9me3 的影响第31-33页
            3.3.4 卵母细胞冷冻对印迹基因表达的影响第33-34页
        3.4 讨论第34-36页
        3.5 小结第36-37页
    第四章 卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育的影响及改善冷冻效率的措施第37-49页
        4.1 实验材料第38页
        4.2 实验方法第38-39页
            4.2.1 囊胚的凋亡染色第38-39页
            4.2.2 囊胚细胞计数第39页
            4.2.3 细胞骨架染色第39页
            4.2.4 体细胞核移植、激活和胚胎培养第39页
        4.3 实验结果第39-47页
            4.3.1 卵母细胞冷冻及不同的恢复时间和激活条件对胚胎发育的影响第39-40页
            4.3.2 卵母细胞冷冻对胚胎质量的影响第40-42页
            4.3.3 卵母细胞冷冻对细胞骨架的影响第42-44页
            4.3.4 白藜芦醇添加对胚胎发育和质量的影响第44-47页
        4.4 讨论第47-48页
        4.5 小结第48-49页
全文结论第49-50页
参考文献第50-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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