摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语简表 | 第15-16页 |
前言 | 第16-20页 |
技术路线 | 第20-22页 |
第一章 鼻咽癌5-8F细胞中过表达DLC1后的基因表达谱分析及验证 | 第22-35页 |
第一节 材料与方法 | 第22-27页 |
1. 材料 | 第22-24页 |
2. 方法 | 第24-27页 |
第二节 实验结果 | 第27-33页 |
1. RNA质量检测 | 第27页 |
2. 过表达DLC1的5-8F细胞中DLC1基因检测 | 第27-28页 |
3. 芯片扫描结果 | 第28页 |
4. 基因表达谱芯片结果分析 | 第28页 |
5. 利用GO和KEGG软件在线分析芯片结果 | 第28-32页 |
6. RT-PCR和Real-time PCR验证芯片结果 | 第32-33页 |
第三节 分析与讨论 | 第33-35页 |
第二章 DLC1通过线粒体凋亡途径促进鼻咽癌细胞凋亡 | 第35-46页 |
第一节 材料与方法 | 第35-40页 |
1. 材料 | 第35-36页 |
2 方法 | 第36-40页 |
第二节 实验结果 | 第40-43页 |
1 Western blot检测5-8F-vector和5-8F-DLC1细胞中DLC-1蛋白的表达 | 第40页 |
2 流式细胞仪检测细胞凋亡,过表达DLC1后鼻咽癌细胞凋亡率上升 | 第40-41页 |
3 线粒体膜电位检测 | 第41页 |
4 过表达DLC1能促进线粒体凋亡关键分子caspase-9和Cytochrome c表达 | 第41-42页 |
5 过表达DLC1能促进Apaf-1和caspase-3的表达 | 第42页 |
6 过表达DLC1,促凋亡分子Bax表达水平上升,抑制凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL表达受到抑制 | 第42-43页 |
第三节 分析与讨论 | 第43-46页 |
第三章 DLC1通过PI3K/Akt和NF-κB/Snail或是TRAF5/NF-κB/Snail信号通路抑制鼻咽癌5-8F细胞侵袭和转移 | 第46-52页 |
第一节 材料和方法 | 第46-47页 |
1、材料 | 第46页 |
2、方法 | 第46-47页 |
第二节 实验结果 | 第47-49页 |
1 过表达DLC1后TNFR相关因子TRAFs家族成员TRAF5在鼻咽癌5-8F细胞中的表达下降 | 第47页 |
2 过表达DLC1后,磷酸化Akt1/2表达受到抑制,PI3K表达下调 | 第47页 |
3 过表达DLC1后,NF-κB家族成员p65以及磷酸化p65、p105表达受到抑制 | 第47页 |
4 过表达DLC1后明显抑制MMP2/7/9在鼻咽癌5-8F细胞中的表达 | 第47-48页 |
5 过表达DLC1后,细胞黏附分子E-cadherin表达明显上升,而转录因子Snail表达受到抑制 | 第48-49页 |
第三节 分析与讨论 | 第49-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
综述 DLC-1与肿瘤 | 第61-68页 |
参考文献 | 第64-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间主要研究成果目录 | 第69页 |