| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 G 蛋白偶联受体简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 G 蛋白偶联受体介绍 | 第10页 |
| 1.1.2 G 蛋白偶联受体的二聚化介绍 | 第10-11页 |
| 1.2 PAC1 简介 | 第11-14页 |
| 1.2.1 PAC1 结构特点 | 第11-12页 |
| 1.2.2 受体 PAC1 介导的生物学功能 | 第12-14页 |
| 1.3 BiFC 和 BRET 检测 PAC1 二聚化的原理 | 第14-15页 |
| 1.3.1 BiFC 检测 PAC1 二聚化的原理 | 第14-15页 |
| 1.3.2 BRET 检测 PAC1 二聚化的原理 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的、意义及主要研究内容 | 第15-18页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 1.5 本研究技术路线简图 | 第18-19页 |
| 第二章 相关载体的构建和鉴定 | 第19-36页 |
| 2.1 实验介绍 | 第19页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 重组真核表达载体 M-PAC1-EYFP 的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.2 重组真核表达载体 M-PAC1-Rluc 的构建 | 第31-33页 |
| 2.3.3 重组真核表达载体 M-PAC1-EYFP/N 的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.4 重组真核表达载体 M-PAC1-EYFP/C 的构建 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 结论 | 第35-36页 |
| 第三章 检测突变体 M-PAC1 二聚化 | 第36-48页 |
| 3.1 实验背景及介绍 | 第36-37页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 3.3.1 重组真核表达载体 M-PAC1-EYFP 在细胞内的表达 | 第40-41页 |
| 3.3.2 BRET 检测突变体 M-PAC1 二聚化 | 第41-43页 |
| 3.3.3 BiFC 检测突变体 M-PAC1 二聚化 | 第43-45页 |
| 3.3.4 Westernblot 检测突变体 M-PAC1 二聚化 | 第45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 3.5 结论 | 第47-48页 |
| 第四章 突变体 M-PAC1 细胞活性和抗凋亡活性的检测 | 第48-56页 |
| 4.1 实验背景及介绍 | 第48页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3 实验结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 MTT 检测细胞的细胞活性 | 第51页 |
| 4.3.2 抗凋亡蛋白 Bcl-2 水平检测 | 第51-52页 |
| 4.3.3 凋亡蛋白 Caspase-3 活性检测 | 第52-53页 |
| 4.3.4 流式细胞术检测细胞抗缺血清诱导的凋亡 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-55页 |
| 4.5 结论 | 第55-56页 |
| 第五章 主要仪器、试剂配制与常用技术 | 第56-65页 |
| 5.1 主要仪器 | 第56-57页 |
| 5.2 主要试剂配方 | 第57-60页 |
| 5.3 常用技术 | 第60-65页 |
| 5.3.1 Western Blotting | 第60-62页 |
| 5.3.2 细胞培养技术 | 第62-63页 |
| 5.3.3 LTX 脂质体转染 | 第63-65页 |
| 第六章 总结、创新性与展望 | 第65-67页 |
| 6.1 总结 | 第65-66页 |
| 6.2 创新性 | 第66页 |
| 6.3 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-80页 |
| 附录 1 pEYFP-N1 Vector 图谱 | 第74-75页 |
| 附录 2 pRluc-N1 Vector 图谱 | 第75-76页 |
| 附录 3 M-PAC1-Rluc 测序图 | 第76-77页 |
| 附录 4 M-PAC1-EYFP 测序图 | 第77-78页 |
| 附录 5 M-PAC1-EYFP/N 测序图 | 第78-79页 |
| 附录 6 M-PAC1-EYFP/C 测序图 | 第79-80页 |
| 硕士期间的成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
