| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| 1.1 鱼类淋巴囊肿病的研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 淋巴囊肿病毒流行病学研究 | 第11-12页 |
| 1.1.2 淋巴囊肿病毒病理学研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 淋巴囊肿病毒结构研究 | 第13-14页 |
| 1.1.4 淋巴囊肿病的生物分子学研究 | 第14-15页 |
| 1.1.5 淋巴囊肿病毒病的预防与治疗 | 第15-16页 |
| 1.2 囊膜病毒侵染机制的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 病毒囊膜蛋白的结构与功能 | 第16-18页 |
| 1.2.2 囊膜病毒的侵染机制 | 第18-20页 |
| 1.3 蛋白表达系统及纯化技术简述 | 第20-26页 |
| 1.3.1 蛋白质纯化技术 | 第20-22页 |
| 1.3.2 蛋白的表达系统 | 第22-26页 |
| 2 淋巴囊肿病毒 32kDa 囊膜蛋白的原核表达及其多抗制备 | 第26-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-35页 |
| 2.1.1 淋巴囊肿病毒的提纯 | 第26-27页 |
| 2.1.2 淋巴囊肿病毒 DNA 的提取及 ORF038 基因表达引物的设计 | 第27-28页 |
| 2.1.3 ORF038 基因片段的扩增、纯化及双酶切 | 第28页 |
| 2.1.4 ORF038 基因与 pET32a 双酶切 | 第28-29页 |
| 2.1.5 连接、转化与阳性菌株检测 | 第29-30页 |
| 2.1.6 表达载体的菌落 PCR 及双酶切检测 | 第30-31页 |
| 2.1.7 表达载体 pET32a-ORF038 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第31页 |
| 2.1.8 SDS-PAGE 检测重组菌表达情况 | 第31-32页 |
| 2.1.9 ORF038 重组表达蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.1.10 多克隆抗体的制备 | 第33页 |
| 2.1.11 ELISA 检测 ORF038 重组蛋白与多抗的结合 | 第33-34页 |
| 2.1.12 Western-blot 检测多抗与重组表达蛋白及 LCDV 蛋白结合 | 第34-35页 |
| 2.1.13 淋巴囊肿病毒 32kDa 蛋白的免疫电镜定位 | 第35页 |
| 2.2 结果 | 第35-39页 |
| 2.2.1 淋巴囊肿病毒粒子的纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.2 LCDV-ORF038 目的片段的扩增 | 第36页 |
| 2.2.3 pET32a-ORF038 重组表达质粒的双酶切检测 | 第36-37页 |
| 2.2.4 重组菌的诱导表达及表达产物的纯化 | 第37-38页 |
| 2.2.5 多抗与 LCDV ORF038 重组表达蛋白的结合 | 第38页 |
| 2.2.6 多抗与重组表达蛋白及 LCDV 蛋白的结合 | 第38-39页 |
| 2.2.7 ORF038 蛋白的免疫电镜结果 | 第39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-42页 |
| 3 LCDV ORF038 重组蛋白与受体蛋白的相互作用 | 第42-47页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.1.1 牙鲆鳃细胞膜蛋白的提取 | 第42页 |
| 3.1.2 阻断 ELISA 实验 | 第42-43页 |
| 3.1.3 FITC 荧光素标记的 ORF038 重组表达蛋白的制备 | 第43页 |
| 3.1.4 免疫荧光技术检测 ORF038 重组表达蛋白与 FG 细胞的结合 | 第43-44页 |
| 3.2 结果 | 第44-45页 |
| 3.2.1 ORF038 重组表达蛋白阻断实验 | 第44页 |
| 3.2.2 LCDV ORF038 重组表达蛋白与 FG 细胞结合的免疫荧光结果 | 第44-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-47页 |
| 4 淋巴囊肿病毒 32kDa 黏附蛋白在感染 FG 细胞中的作用 | 第47-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 4.1.1 FG 细胞的体外培养 | 第47页 |
| 4.1.2 病毒体外感染中和实验 | 第47-48页 |
| 4.2 结果 | 第48-50页 |
| 4.2.1 FG 细胞的培养状况 | 第48页 |
| 4.2.2 抗 ORF038 重组蛋白多抗抑制 LCDV 侵染 FG 细胞 | 第48-50页 |
| 4.3 讨论 | 第50-52页 |
| 总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简历 | 第60页 |
| 硕士期间发表文章 | 第60-61页 |
