| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 大肠癌 | 第10页 |
| 1.2 Livin 基因与大肠癌 | 第10-11页 |
| 1.3 siRNA 转染 | 第11-12页 |
| 1.4 miRNAs 与大肠癌 | 第12-13页 |
| 1.5 miRNAs 与 Livin 基因 | 第13-15页 |
| 第2章 材料和方法 | 第15-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞培养所需的的试剂以及材料 | 第15页 |
| 2.1.3 完全细胞培养基的配置 | 第15页 |
| 2.1.4 siRNA 转染相关试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.5 总 RNA 的提取 | 第16页 |
| 2.1.6 逆转录相关 | 第16页 |
| 2.1.7 qPCR 相关 | 第16页 |
| 2.1.8 Livin-siRNA 及 Livin 引物的合成 | 第16页 |
| 2.1.9 生物信息学预测软件 | 第16-17页 |
| 2.2 主要仪器以及设备 | 第17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-23页 |
| 2.3.1 大肠癌 HT-29 细胞系的体外培养 | 第17-19页 |
| 2.3.2 siRNA 转染 HT-29 细胞 | 第19页 |
| 2.3.3 QPCR 检测转染后 Livin mRNA 的表达 | 第19-21页 |
| 2.3.4 RNA 提取、 RNA 质量检测、miRNA 芯片检测 | 第21页 |
| 2.3.5 生物信息学软件筛选 Livin（BIRC7）基因相关的 miRNAs | 第21-22页 |
| 2.3.6 QPCR 验证转染后 hsa-miR-486-3p，762，148b-3p mRNA 的表达 | 第22-23页 |
| 2.4 统计学分析 | 第23-24页 |
| 第3章 结果 | 第24-32页 |
| 3.1 HT-29 细胞生长状况 | 第24页 |
| 3.2 QPCR 检测 siRNA 抑制 Livin 基因表达 | 第24-25页 |
| 3.3 miRNA 芯片检测 Livin 基因抑制后 miRNAs 差异表达 | 第25-28页 |
| 3.3.1 RNA 质量检测结果 | 第25-26页 |
| 3.3.2 miRNA 芯片结果 | 第26-28页 |
| 3.4 生物信息学软件筛选 Livin（BIRC7）基因相关的 miRNAs | 第28页 |
| 3.5 hsa-miR-486-3p,762, 148b-3p 的靶基因及生物学功能分析 | 第28-29页 |
| 3.6 QPCR 验证转染后 hsa-miR-486-3p,762, 148b-3p mRNA 的表达 | 第29-32页 |
| 第4章 讨论 | 第32-38页 |
| 第5章 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
| 综述 | 第47-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
