| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1.1 蜘蛛香及其有效成分的研究概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 蜘蛛香及蜘蛛香素E简介 | 第13页 |
| 1.1.2 蜘蛛香抗焦虑的研究概述 | 第13-14页 |
| 1.2 谷氨酸受体在焦虑症中的研究现状 | 第14-17页 |
| 1.3 钙离子在中枢神经系统中作用与意义 | 第17-18页 |
| 1.4 基于钙流的GPCR高通量药物筛选 | 第18-19页 |
| 1.5 本课题的背景 | 第19页 |
| 1.6 本课题的创新性与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 Vero-Ga15-mGluR2和Vero-Ga15-mGluR3转染细胞的构建 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第20页 |
| 2.1.2 主要样品和试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 mGluR2和mGluR3、GNA15真核表达载体的构建 | 第21-24页 |
| 2.2.2 质粒制备 | 第24页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第24-26页 |
| 2.2.4 Real-TimePCR验证细胞株目的基因GNA15、mGluR2和mGluR3的表达 | 第26-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 真核表达载体的构建时PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 GNA15、mGluR2、mGluR3菌液PCR结果 | 第29页 |
| 2.3.3 序列测定与结果 | 第29页 |
| 2.3.4 质粒提取结果 | 第29-30页 |
| 2.3.5 转染细胞的筛选结果 | 第30页 |
| 2.3.6 RNA浓度及纯度以及RNA电泳图结果 | 第30-31页 |
| 2.3.7 目的基因GNA15、mGluR2和mGluR3的表达结果 | 第31-33页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第33-35页 |
| 第三章 蜘蛛香环烯醚萜类成分对mGluR2和mGluR3的激动作用 | 第35-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第35页 |
| 3.1.2 实验药物 | 第35页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验步骤 | 第36-38页 |
| 3.2.1 细胞培养的准备 | 第36页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第36页 |
| 3.2.3 CCK-8法检测TIV和蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR2和Vero-Ga15-mGluR3细胞存活的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.4 TIV和蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR2细胞内Ca~(2+)的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.5 TIV和蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR3细胞内Ca~(2+)的影响 | 第38页 |
| 3.3 数据统计 | 第38页 |
| 3.4 实验结果 | 第38-48页 |
| 3.4.1 TIV和蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR2细胞存活的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 TIV和蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR3细胞存活的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.3 TIV对Vero-Ga15-mGluR2细胞内Ca~(2+)的影响 | 第40-42页 |
| 3.4.4 蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR2细胞内Ca~(2+)的影响 | 第42-44页 |
| 3.4.5 TIV对Vero-Ga15-mGluR3细胞内Ca~(2+)的影响 | 第44-46页 |
| 3.4.6 蜘蛛香素E对Vero-Ga15-mGluR3细胞内Ca~(2+)的影响 | 第46-48页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第48-50页 |
| 第四章 蜘蛛香环烯醚萜类成分对大鼠大脑皮质突触体内Ca~(2+)浓度的影响 | 第50-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第50页 |
| 4.1.2 实验药物 | 第50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 突触体的制备与鉴定 | 第51-52页 |
| 4.2.2 TIV对大鼠大脑皮质突触体内Ca~(2+)的影响 | 第52-53页 |
| 4.2.3 蜘蛛香素E对大鼠大脑皮质突触体内Ca~(2+)的影响 | 第53页 |
| 4.3 数据分析 | 第53页 |
| 4.4 结果与分析 | 第53-58页 |
| 4.4.1 透射电镜鉴定结果 | 第53-54页 |
| 4.4.2 大鼠大脑皮质突触体LDH活性 | 第54-55页 |
| 4.4.3 TIV对大鼠大脑皮质突触体内Ca~(2+)的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.4 蜘蛛香素E对大鼠大脑皮质突触体内Ca~(2+)的影响 | 第56-58页 |
| 4.5 讨论与小结 | 第58-60页 |
| 第五章 TIV对应激焦虑大鼠的抗焦虑作用机制研究 | 第60-80页 |
| 5.1 实验材料 | 第60-63页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第60页 |
| 5.1.2 实验药物 | 第60页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第60-61页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第61页 |
| 5.1.5 药液配制 | 第61-62页 |
| 5.1.6 WesternBlot实验试剂配制 | 第62-63页 |
| 5.2 实验方法 | 第63-68页 |
| 5.2.1 实验分组、造模及给药 | 第63页 |
| 5.2.2 宏观指标的观察 | 第63页 |
| 5.2.3 大鼠敞箱实验 | 第63-64页 |
| 5.2.4 大鼠高架十字迷宫实验 | 第64页 |
| 5.2.5 AC活性、cAMP含量、Glu含量检测 | 第64页 |
| 5.2.6 mGluR2、mGluR3、PKAa/b/g蛋白表达检测 | 第64-68页 |
| 5.3 数据分析 | 第68页 |
| 5.4 实验结果 | 第68-78页 |
| 5.4.1 各组大鼠宏观表征观察 | 第68页 |
| 5.4.2 敞箱实验结果 | 第68-70页 |
| 5.4.3 高架十字迷宫实验结果 | 第70-71页 |
| 5.4.4 TIV对应激焦虑大鼠大脑皮质AC活性的影响 | 第71-72页 |
| 5.4.5 TIV对应激焦虑大鼠大脑皮质cAMP含量的影响 | 第72-73页 |
| 5.4.6 TIV对应激焦虑大鼠大脑皮质Glu含量的影响 | 第73-74页 |
| 5.4.7 TIV对应激焦虑大鼠大脑皮质mGluR2、mGluR3蛋白表达的影响 | 第74-77页 |
| 5.4.8 TIV对应激焦虑大鼠大脑皮质PKAa/b/g蛋白表达的影响 | 第77-78页 |
| 5.5 讨论与小结 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士期间发表的论文及科研成果 | 第90页 |
