| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第9-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 远志鲨烯环氧酶基因的克隆及序列分析研究 | 第16-50页 |
| 材料与方法 | 第16-33页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.1 植物材料 | 第16页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第16页 |
| 1.3 酶和试剂 | 第16页 |
| 1.4 培养基类型 | 第16-17页 |
| 1.5 仪器及设备 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-33页 |
| 2.1 远志根总RNA的提取 | 第17-19页 |
| 2.2 cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
| 2.3 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 2.4 远志鲨烯环氧酶基因核心片段扩增 | 第21-22页 |
| 2.5 远志鲨烯环氧酶基因5'RACE扩增 | 第22-26页 |
| 2.6 远志鲨烯环氧酶基因3'RACE扩增 | 第26-29页 |
| 2.7 远志鲨烯环氧酶基因cDNA全长扩增 | 第29-32页 |
| 2.8 远志鲨烯环氧酶基因生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 结果与讨论 | 第33-48页 |
| 1 远志总RNA的提取及质量检测 | 第33页 |
| 2 远志鲨烯环氧酶基因核心片段扩增与分析 | 第33-35页 |
| 3 远志鲨烯环氧酶基因5'RACE扩增与分析 | 第35-36页 |
| 4 远志鲨烯环氧酶基因3'RACE扩增与分析 | 第36-37页 |
| 5 远志鲨烯环氧酶基因全长序列拼接 | 第37页 |
| 6 远志鲨烯环氧酶基因全长序列扩增与分析 | 第37-38页 |
| 7 远志鲨烯环氧酶基因生物信息学分析 | 第38-48页 |
| 7.1 ORF分析及BLAST分析 | 第38-41页 |
| 7.2 蛋白基本理化性质及结构功能预测 | 第41-45页 |
| 7.3 ClustalX多重序列比对及系统进化树分析 | 第45-48页 |
| 小结 | 第48-50页 |
| 第二章 鲨烯环氧酶基因对细叶远志皂苷含量影响研究 | 第50-64页 |
| 材料与方法 | 第50-56页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 植物材料 | 第50页 |
| 1.2 酶和试剂 | 第50页 |
| 1.3 仪器及设备 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-56页 |
| 2.1 细叶远志皂苷的含量测定 | 第51-53页 |
| 2.2 远志SE基因的表达分析 | 第53-55页 |
| 2.3 细叶远志皂苷含量与SE基因表达量相关分析 | 第55-56页 |
| 结果与讨论 | 第56-63页 |
| 1 方法学考察 | 第56-58页 |
| 1.1 线性范围考察 | 第56页 |
| 1.2 精密度试验 | 第56页 |
| 1.3 稳定性试验 | 第56页 |
| 1.4 重复性试验 | 第56页 |
| 1.5 加样回收率试验 | 第56-58页 |
| 2 细叶远志皂苷含量测定 | 第58-59页 |
| 3 远志总RNA的提取及质量检测 | 第59页 |
| 4 RT-qPCR熔解曲线与扩增曲线 | 第59-61页 |
| 4.1 熔解曲线 | 第59-60页 |
| 4.2 扩增曲线 | 第60-61页 |
| 5 远志SE基因相对表达量 | 第61-62页 |
| 6 细叶远志皂苷含量与SE基因表达量相关分析 | 第62-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 第三章 基于转录组的远志皂苷生物合成关键酶基因挖掘研究 | 第64-81页 |
| 材料与方法 | 第64-67页 |
| 1 实验材料 | 第64-65页 |
| 1.1 植物材料 | 第64页 |
| 1.2 试剂 | 第64页 |
| 1.3 仪器及设备 | 第64-65页 |
| 2 实验方法 | 第65-67页 |
| 2.1 远志总RNA的提取 | 第65页 |
| 2.2 文库构建及Illumina测序 | 第65-66页 |
| 2.3 denovo组装 | 第66页 |
| 2.4 转录组的功能注释 | 第66-67页 |
| 结果与讨论 | 第67-80页 |
| 1 远志总RNA的提取及质量检测 | 第67-68页 |
| 2 从头组装 | 第68-69页 |
| 3 基因功能注释 | 第69-76页 |
| 3.1 NR库注释 | 第71-73页 |
| 3.2 GO注释 | 第73-74页 |
| 3.3 COG注释 | 第74-75页 |
| 3.4 KEGG注释 | 第75-76页 |
| 4 三萜皂苷生物合成通路相关基因 | 第76-80页 |
| 小结 | 第80-81页 |
| 第四章 总结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 文献综述 | 第87-102页 |
| 综述参考文献 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第103-104页 |
| 个人简介 | 第104-105页 |
| 开题、中期及学位论文答辩委员组成 | 第105页 |