摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 文献综述 | 第9-25页 |
1.1 纳米抗体 | 第9-14页 |
1.1.1 纳米抗体的简介 | 第9-11页 |
1.1.2 纳米抗体的性质 | 第11页 |
1.1.3 纳米抗体的应用 | 第11-14页 |
1.2 抗体文库的研究进展 | 第14-20页 |
1.2.1 抗体文库的分类 | 第15-19页 |
1.2.2 噬菌体展示技术 | 第19-20页 |
1.3 乏氧诱导因子-1 | 第20-23页 |
1.3.1 HIF-1α的结构 | 第20-21页 |
1.3.2 HIF-1α的调节机制 | 第21-22页 |
1.3.3 靶向作用HIF-1α在肿瘤治疗中的应用 | 第22-23页 |
1.4 本课题研究思路 | 第23-25页 |
第2章 全合成纳米抗体文库的设计、构建及质量鉴定 | 第25-45页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 载体及菌株 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 实验器材 | 第26页 |
2.1.4 培养基、溶液的配置及其灭菌方法 | 第26-27页 |
2.2 全合成纳米抗体文库的构建 | 第27-37页 |
2.2.1 全合成纳米抗体文库序列的设计 | 第27-30页 |
2.2.2 全合成纳米抗体文库的构建 | 第30-36页 |
2.2.3 全合成纳米抗体文库的质量鉴定 | 第36-37页 |
2.3 实验结果及讨论 | 第37-43页 |
2.3.1 全合成纳米抗体文库的设计 | 第37-39页 |
2.3.2 全合成纳米抗体文库的构建 | 第39-41页 |
2.3.3 全合成纳米抗体文库的质量鉴定 | 第41-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-45页 |
第3章 HIF-1α-PAS-B抗原的制备 | 第45-63页 |
3.1 实验材料 | 第45-48页 |
3.1.1 载体及菌株 | 第45页 |
3.1.2 实验试剂 | 第45页 |
3.1.3 实验器材 | 第45-47页 |
3.1.4 溶液、培养基的配置及其灭菌方法 | 第47-48页 |
3.2 试验方法 | 第48-55页 |
3.2.1 HIF-1α-PAS-B抗原在pGEX-4T-1中的表达及纯化 | 第48-50页 |
3.2.2 pET-30a-HIF-1α-PAS-B表达载体的构建 | 第50-53页 |
3.2.3 HIF-1α-PAS-B抗原在pET-30a中的表达及纯化 | 第53-55页 |
3.3 实验结果及讨论 | 第55-61页 |
3.3.1 GST_HIF-1α-PAS-B融合蛋白的表达与纯化 | 第55-58页 |
3.3.2 pET-30a-HIF-1α-PAS-B表达载体的构建 | 第58页 |
3.3.3 His_HIF-1α-PAS-B融合蛋白的表达与纯化 | 第58-61页 |
3.4 本章小结 | 第61-63页 |
第4章 HIF-1α-PAS-B特异性纳米抗体的筛选 | 第63-73页 |
4.1 实验材料 | 第63-65页 |
4.1.1 菌株及噬菌体 | 第63页 |
4.1.2 实验试剂 | 第63页 |
4.1.3 实验器材 | 第63-64页 |
4.1.4 溶液、培养基的配置及其灭菌方法 | 第64-65页 |
4.2 实验方法 | 第65-68页 |
4.2.1 M13K07辅助噬菌体的扩增及滴度测定 | 第65页 |
4.2.2 合成纳米抗体文库的扩增及滴度测定 | 第65-66页 |
4.2.3 HIF-1α-PAS-B特异性纳米抗体的筛选 | 第66-68页 |
4.2.4 HIF-1α-PAS-B特异性纳米抗体的鉴定 | 第68页 |
4.3 实验结果 | 第68-71页 |
4.3.1 辅助噬菌体M13K07的滴度 | 第68-69页 |
4.3.2 合成纳米抗体文库的滴度 | 第69-70页 |
4.3.3 HIF-1α-PAS-B特异性纳米抗体的筛选 | 第70页 |
4.3.4 HIF-1α-PAS-B特异性纳米抗体的鉴定 | 第70-71页 |
4.4 本章小结 | 第71-73页 |
第5章 结论与展望 | 第73-75页 |
5.1 结论 | 第73页 |
5.2 展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |