| 英文略缩表 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 牛传染性鼻气管炎(IBRV)的概述 | 第12-18页 |
| 1.1 IBRV的分类地位 | 第12页 |
| 1.2 形态理化特性 | 第12页 |
| 1.3 IBRV基因组结构及主要结构蛋白 | 第12-14页 |
| 1.4 IBRV致病机制 | 第14-15页 |
| 1.5 IBRV的免疫抑制机制 | 第15-16页 |
| 1.6 流行病学 | 第16-17页 |
| 1.7 预防措施 | 第17-18页 |
| 第二章 细胞自噬研究进展 | 第18-30页 |
| 2.1 细胞自噬的生物学功能及其过程 | 第18-20页 |
| 2.2 细胞自噬的信号调节 | 第20-22页 |
| 2.2.1 依赖mTOR的信号途径 | 第20-21页 |
| 2.2.2 不依赖mTOR的信号途径 | 第21-22页 |
| 2.3 病毒感染与细胞自噬 | 第22-24页 |
| 2.3.1 疱疹病毒 | 第22-23页 |
| 2.3.2 乳头瘤病毒科 | 第23页 |
| 2.3.3 多瘤病毒科 | 第23页 |
| 2.3.4 嗜肝DNA病毒 | 第23页 |
| 2.3.5 小核糖核酸病毒科 | 第23-24页 |
| 2.3.6 黄病毒科 | 第24页 |
| 2.4 自噬与免疫 | 第24-26页 |
| 2.5 自噬的研究方法 | 第26-28页 |
| 2.5.1 透射电镜观察自噬体结构 | 第26页 |
| 2.5.2 WesternBlot检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ的相对表达量 | 第26-27页 |
| 2.5.3 细胞免疫荧光 | 第27页 |
| 2.5.4 p62蛋白的降解 | 第27-28页 |
| 2.5.5 LC3-Ⅱ的Turnover实验 | 第28页 |
| 2.6 IBRV与细胞自噬 | 第28-29页 |
| 2.7 研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 第三章 IBRV感染MDBK细胞引起不完全自噬 | 第30-43页 |
| 3.1 材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 实验毒株和细胞 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要试剂及抗体 | 第31-32页 |
| 3.1.4 培养液和试剂的配置 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第32页 |
| 3.2.2 细胞扩大培养 | 第32-33页 |
| 3.2.3 IBRV复壮 | 第33页 |
| 3.2.4 TCID50的测定 | 第33页 |
| 3.2.5 WesernBlot检测分析自噬相关蛋白LC3-Ⅱ,p | 第33-35页 |
| 3.2.6 透射电镜观察自噬体 | 第35-36页 |
| 3.2.7 药物处理实验 | 第36页 |
| 3.2.8 LC3-ⅡTurnover实验 | 第36页 |
| 3.3 实验结果 | 第36-41页 |
| 3.3.1 IBRV感染能诱导自噬体的产生 | 第36-37页 |
| 3.3.2 不同药物作用不影响MDBK细胞活性 | 第37-38页 |
| 3.3.3 IBRV感染引起LC3-Ⅱ升高,但不引起p62的变化 | 第38-40页 |
| 3.3.4 IBRV引起的自噬为不完全自噬 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 细胞自噬抑制IBRV增殖复制 | 第43-56页 |
| 4.1 材料 | 第43页 |
| 4.1.1 病毒和细胞 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第43页 |
| 4.2 方法 | 第43-50页 |
| 4.2.1 主要试剂的配置 | 第43-44页 |
| 4.2.3 WesternBlot分析药物干扰自噬的效果 | 第44页 |
| 4.2.4 干扰自噬后病毒滴度的测定 | 第44-45页 |
| 4.2.5 IBRV模板DNA的制备 | 第45页 |
| 4.2.6 pcDNA3.1-IBRV-gB阳性质粒的构建 | 第45-49页 |
| 4.2.7 实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第49-50页 |
| 4.2.8 SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR的特异性试验 | 第50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-55页 |
| 4.3.1 雷帕霉素/渥曼青霉素能促进/抑制MDBK的自噬水平 | 第50-51页 |
| 4.3.2 提高自噬能够降低IBRV病毒滴度 | 第51-52页 |
| 4.3.3 IBRV-gB阳性质粒构建 | 第52-53页 |
| 4.3.4 提高自噬能够降低IBRV基因拷贝数 | 第53-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
