| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 链霉亲和素结构与功能 | 第11-14页 |
| 1.1.1 链霉亲和素 | 第11-13页 |
| 1.1.2 重组链霉亲和素 | 第13-14页 |
| 1.2 链霉亲和素与BSA系统 | 第14-16页 |
| 1.2.1 BSA系统在免疫发光技术中的的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 BSA系统在组织化学中的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 BSA系统在免疫酶联吸附法中的应用 | 第16页 |
| 1.3 链霉亲和素的分离纯化 | 第16-17页 |
| 1.4 液相色谱对蛋白质的分离与纯化 | 第17-20页 |
| 1.4.1 体积排阻色谱法 | 第17-18页 |
| 1.4.2 亲和色谱法 | 第18-19页 |
| 1.4.3 离子交换色谱法 | 第19-20页 |
| 1.4.4 疏水相互作用色谱法 | 第20页 |
| 1.5 本论文的研究工作及意义 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-29页 |
| 第二章 链霉亲和素在大肠杆菌中高效表达的条件筛选 | 第29-41页 |
| 2.1 引言 | 第29-30页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第30-31页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.3 菌种 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-32页 |
| 2.3.1 试剂的配制 | 第31-32页 |
| 2.3.2 链霉亲和素工程菌的培养、诱导表达 | 第32页 |
| 2.3.3 链霉亲和素发酵液的回收 | 第32页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第32-38页 |
| 2.4.1 不同培养基中生长曲线和诱导时机的选择 | 第32-33页 |
| 2.4.2 诱导时间对链霉亲和素工程菌表达的影响 | 第33-35页 |
| 2.4.3 碳源对链霉亲和素工程菌表达的影响 | 第35页 |
| 2.4.4 IPTG浓度对链霉亲和素工程菌表达的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.5 温度对链霉亲和素工程菌表达的影响 | 第36页 |
| 2.4.6 不同缓冲液对洗涤包涵体回收的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.7 优化链霉亲和素的回收条件 | 第37-38页 |
| 2.5 小结 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第三章 以卞胺为配基的固定相制备及其对链霉亲和素的纯化与同时复性 | 第41-59页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2 仪器与主要材料 | 第42-43页 |
| 3.2.1 仪器 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要材料 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.3.1 以卞胺为配基的色谱固定相的合成 | 第43-44页 |
| 3.3.2 固定相表征与色谱柱装填 | 第44页 |
| 3.3.3 以卞胺为配基的色谱柱对标准蛋白的分离 | 第44页 |
| 3.3.4 以卞胺为配基的色谱柱对蛋白保留的特征测试 | 第44页 |
| 3.3.5 HPHIC模式下分离鸡蛋清和猪心 | 第44-45页 |
| 3.3.6 HPHIC模式下对链霉亲和素复性与同时纯化 | 第45页 |
| 3.3.7 链霉亲和素的理化性能分析 | 第45页 |
| 3.3.8 链霉亲和素的活性测定 | 第45-46页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第46-56页 |
| 3.4.1 固定相的合成与表征 | 第46-47页 |
| 3.4.2 以卞胺为配基的固定相的分离性能 | 第47页 |
| 3.4.3 HPHIC模式下pH对蛋白保留的影响 | 第47-50页 |
| 3.4.4 HPHIC模式下盐浓度对蛋白保留的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.5 HPHIC模式下对鸡蛋清样品的分离与纯化 | 第51-54页 |
| 3.4.6 HPHIC模式下对猪心中细胞色素C的分离 | 第54-55页 |
| 3.4.7 HPHIC模式下对链霉亲和素的复性与同时纯化 | 第55-56页 |
| 3.4.8 链霉亲和素活性测定 | 第56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第四章 高效疏水相互作用色谱法对链霉亲和素的复性与同时纯化 | 第59-71页 |
| 4.1 前言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第60页 |
| 4.2.1 材料 | 第60页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第60页 |
| 4.3 实验方法 | 第60-61页 |
| 4.3.1 色谱条件与操作 | 第60页 |
| 4.3.2 目的蛋白的理化性能分析 | 第60页 |
| 4.3.3 链霉亲和素活性测定 | 第60-61页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第61-66页 |
| 4.4.1 以苯乙胺为配基的固定相对链霉亲和素的复性与同时纯化 | 第61页 |
| 4.4.2 以苯丙胺为配基的固定相对链霉亲和素的复性与同时纯化 | 第61-62页 |
| 4.4.3 以色氨酸为配基的固定相对链霉亲和素的复性与同时纯化 | 第62-63页 |
| 4.4.4 链霉亲和素复性与纯化条件的优化 | 第63-65页 |
| 4.4.5 优化条件下链霉亲和素理化性质分析 | 第65-66页 |
| 4.4.6 链霉亲和素活性测定 | 第66页 |
| 4.4.7 圆二色光谱分析 | 第66页 |
| 4.5 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 论文总结 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第75页 |
