缩略语表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-14页 |
ABSTRACT | 第14-19页 |
前言 | 第19-21页 |
文献回顾 | 第21-32页 |
一、结直肠癌的概况 | 第21-22页 |
二、结直肠癌的病因 | 第22-24页 |
三、结直肠癌发生发展的分子生物学 | 第24-25页 |
四 、结直肠癌的治疗 | 第25-27页 |
五 、NDRG 基因家族的研究进展 | 第27-29页 |
六、NDRG2 基因的研究进展 | 第29-32页 |
第一部分 NDRG2 在临床结直肠癌标本中的表达 | 第32-53页 |
1 材料 | 第32-35页 |
·临床病例资料 | 第32-34页 |
·主要仪器和试剂 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-44页 |
·总RNA 提取及反转录 | 第35-37页 |
·RT-PCR | 第37-38页 |
·Real time PCR | 第38-40页 |
·蛋白印迹 | 第40-43页 |
·免疫组织化学染色 | 第43-44页 |
·统计学分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-49页 |
·RT-PCR 结果 | 第44-45页 |
·Real time PCR 结果 | 第45-47页 |
·蛋白印迹结果 | 第47-48页 |
·免疫组织化学染色结果 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
第二部分 NDRG2 的表达与临床病理资料以及预后的关系 | 第53-78页 |
1 材料 | 第53-56页 |
·临床病例资料 | 第53-55页 |
·主要仪器和试剂 | 第55-56页 |
2 方法 | 第56-59页 |
·Real time PCR | 第56页 |
·蛋白印迹 | 第56页 |
·组织芯片制作 | 第56-58页 |
·免疫组织化学染色 | 第58页 |
·免疫组织化学染色结果判读 | 第58-59页 |
·统计学分析 | 第59页 |
3 结果 | 第59-73页 |
·基于Real time PCR 结果的临床病理资料和生存分析结果 | 第59-65页 |
·蛋白印迹验证NDRG2 mRNA 表达与临床病理资料的关系 | 第65-67页 |
·组织芯片免疫组织化学染色分析NDRG2 蛋白表达量与CRC 病例预后的关系 | 第67-73页 |
4 讨论 | 第73-78页 |
第三部分 过表达和干涉NDRG2 对结肠癌SW620 细胞系周期、凋亡、侵袭和体内成瘤能力的影响 | 第78-101页 |
1 材料 | 第78-80页 |
·结肠癌细胞系、载体和Stealth RNAi? siRNA | 第78页 |
·实验动物 | 第78-79页 |
·主要仪器和试剂 | 第79-80页 |
2 方法 | 第80-87页 |
·细胞培养 | 第80-82页 |
·质粒提取 | 第82-83页 |
·NDRG2 过表达和RNA 干涉的SW620 细胞系的建立 | 第83页 |
·软琼脂克隆形成实验 | 第83-84页 |
·MTT 检测细胞生长 | 第84-85页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第85页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第85-86页 |
·细胞侵袭实验 | 第86页 |
·裸鼠皮下移植瘤模型建立 | 第86-87页 |
3 结果 | 第87-97页 |
·NDRG2 稳定转染和干涉的SW620 细胞系的鉴定 | 第87-90页 |
·软琼脂克隆形成实验结果 | 第90-91页 |
·MTT 实验结果 | 第91-92页 |
·流式细胞仪检测细胞周期的结果 | 第92-93页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡的结果 | 第93-94页 |
·Transwell 细胞侵袭实验结果 | 第94-95页 |
·裸鼠皮下移植瘤实验结果 | 第95-97页 |
4 讨论 | 第97-101页 |
第四部分 NDRG2 在结直肠癌中发挥抑癌作用的初步机制研究 | 第101-116页 |
1 材料 | 第102-104页 |
·临床病例资料 | 第102页 |
·结肠癌细胞系 | 第102页 |
·主要仪器和试剂 | 第102-104页 |
2 方法 | 第104-105页 |
·组织芯片制作 | 第104页 |
·免疫组织化学染色 | 第104页 |
·免疫组织化学染色结果判读 | 第104页 |
·细胞培养 | 第104页 |
·NDRG2 稳定转染和干涉的SW620 细胞系的建立 | 第104-105页 |
·Real time PCR | 第105页 |
·蛋白印迹 | 第105页 |
·统计学分析 | 第105页 |
3 结果 | 第105-111页 |
·组织芯片分析NDRG2 与p65 表达关系的结果 | 第105-106页 |
·过表达和干涉NDRG2 后SW620 细胞p65 的表达 | 第106-108页 |
·NDRG2 和p65 与CRC 病例预后的关系 | 第108-111页 |
4 讨论 | 第111-116页 |
小结 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-125页 |
个人简历和研究成果 | 第125-128页 |
致谢 | 第128-129页 |