| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-48页 |
| 1.1 多不饱和脂肪生物学活性及代谢途径 | 第19-26页 |
| 1.1.1 脂肪酸的分类 | 第19-20页 |
| 1.1.2 多不饱和脂肪酸(PUFA)在植物体中的生理功能 | 第20-21页 |
| 1.1.3 多不饱和脂肪酸在人体中药理作用 | 第21-24页 |
| 1.1.4 植物多不饱和脂肪酸的生物合成途径 | 第24-26页 |
| 1.2 脂肪酸脱氢酶概述 | 第26-31页 |
| 1.2.1 脂肪酸脱氢酶的种类 | 第26-27页 |
| 1.2.2 植物脂肪酸脱氢酶基因的结构特征 | 第27-29页 |
| 1.2.3 脂肪酸脱氢酶的结构特征 | 第29-30页 |
| 1.2.4 脂肪酸脱氢酶的催化机理以及活性中心 | 第30-31页 |
| 1.3 ω-6脂肪酸脱氢酶基因(FAD2,FAD6)的研究进展 | 第31-36页 |
| 1.3.1 ω-6脂肪酸脱氢酶基因的分类 | 第31-32页 |
| 1.3.2 FAD2基因的拷贝数目及组织表达规律 | 第32-33页 |
| 1.3.3 FAD2基因对低温的应答规律及表达调控 | 第33-35页 |
| 1.3.4 FAD2的功能研究 | 第35页 |
| 1.3.5 FAD2在油料作物基因工程育种中取得的成就 | 第35-36页 |
| 1.4 ω-3脂肪酸脱氢酶基因研究进展 | 第36-41页 |
| 1.4.1 ω-3脂肪酸脱氢酶基因的分类 | 第36-37页 |
| 1.4.2 ω-3脂肪酸脱氢酶基因的拷贝数目及组织表达 | 第37-38页 |
| 1.4.3 ω-3脂肪酸脱氢酶基因对低温的应答机制 | 第38-40页 |
| 1.4.4 ω-3脂肪酸脱氢酶基因在植物基因工程育种中应用 | 第40页 |
| 1.4.5 多功能的ω-6/ω-3脂肪酸脱氢酶的发现 | 第40-41页 |
| 1.5 红花籽油脂肪酸组成研究进展 | 第41-44页 |
| 1.5.1 红花籽主要用途 | 第42-43页 |
| 1.5.2 红花种子中脂肪酸的组成及遗传特性 | 第43-44页 |
| 1.6 研究的目的意义及技术路线 | 第44-48页 |
| 1.6.1 研究的目的意义 | 第44-47页 |
| 1.6.2 研究路线 | 第47-48页 |
| 第二章 红花ω-6脂肪酸脱氢酶基因克隆及生物信息学分析 | 第48-70页 |
| 2.1 前言 | 第49-50页 |
| 2.2 材料与方法 | 第50-57页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第50页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第50-51页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
| 2.2.4 RT-PCR扩增ω-6脂肪酸脱氢酶基因片段 | 第52-56页 |
| 2.2.5 RT-RACE克隆ω-6脂肪酸脱氢酶基因cDNA 3'/5'端 | 第56-57页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第57页 |
| 2.3 结果与分析 | 第57-67页 |
| 2.3.1 ω-6脂肪酸脱氢酶基因家族保守片段的克隆 | 第57-59页 |
| 2.3.2 基因序列分析 | 第59-60页 |
| 2.3.3 红花FAD2各拷贝间氨基酸序歹lJ同源性分析 | 第60-63页 |
| 2.3.4 亲/疏水性及跨膜分析 | 第63-66页 |
| 2.3.5 氨基酸序列二级结构预测 | 第66-67页 |
| 2.4 讨论 | 第67-70页 |
| 2.4.1 植物FAD2基因的拷贝数目与亚油酸含量的关系 | 第67-68页 |
| 2.4.2 红花ω-6脂肪酸脱氢酶的生物信息学分析 | 第68-70页 |
| 第三章 红花ω-3脂肪酸脱氢酶基因的分离及结构分析 | 第70-88页 |
| 3.1 前言 | 第71-72页 |
| 3.2 材料与方法 | 第72-75页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第72页 |
| 3.2.2 RNA提取及反转录 | 第72页 |
| 3.2.3 DNA的提取及纯化 | 第72-73页 |
| 3.2.4 RT-PCR扩增ω-3脂肪酸脱氢酶基因片段 | 第73-74页 |
| 3.2.5 RT-RACE克隆ω-3脂肪酸脱氢酶基因cDNA3'/5'端 | 第74-75页 |
| 3.2.6 序列分析及结构预测 | 第75页 |
| 3.3 结果与分析 | 第75-84页 |
| 3.3.1 ω-3脂肪酸脱氢酶基因家族保守片段的克隆 | 第75-77页 |
| 3.3.2 基因序列分析 | 第77-80页 |
| 3.3.3 亲/疏水性及跨膜分析 | 第80-83页 |
| 3.3.4 氨基酸序列二级结构预测 | 第83-84页 |
| 3.3.5 基因结构分析 | 第84页 |
| 3.4 讨论 | 第84-88页 |
| 3.4.1 红花FAD3基因的出现 | 第84-86页 |
| 3.4.2 红花CtFAD7和CtFAD8的基因结构分析 | 第86-87页 |
| 3.4.3 红花ω-3脂肪酸脱氢酶基因的生物信息学分析 | 第87-88页 |
| 第四章 红花ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶基因对PUFA的代谢调控 | 第88-116页 |
| 4.1 前言 | 第89-91页 |
| 4.2 材料与方法 | 第91-96页 |
| 4.2.1 试验材料的处理 | 第91页 |
| 4.2.2 RNA提取及反转录 | 第91页 |
| 4.2.3 引物设计 | 第91页 |
| 4.2.4 标准品制作 | 第91-94页 |
| 4.2.5 实时荧光定量PCR | 第94-95页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第95页 |
| 4.2.7 红花各组织脂肪酸的含量测定 | 第95-96页 |
| 4.3 结果与分析 | 第96-110页 |
| 4.3.1 基因的标准曲线及Real-time PCR扩增 | 第96-97页 |
| 4.3.2 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶家族基因的组织表达谱与脂肪酸组成的关系 | 第97-104页 |
| 4.3.3 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶家族基因在种子不同发育时期中对多不饱和脂肪酸的合成调控 | 第104-107页 |
| 4.3.4 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶家族基因在低温下对多不饱和脂肪酸的合成调控 | 第107-110页 |
| 4.4 讨论 | 第110-116页 |
| 4.4.1 红花各组织中脂肪酸组成特点及调控机制 | 第110-113页 |
| 4.4.2 红花脂肪酸组成对低温的响应及调控机制 | 第113-114页 |
| 4.4.3 红花ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶基因对低温的响应 | 第114-116页 |
| 第五章 红花高/低亚油酸品系形成的分子机制 | 第116-133页 |
| 5.1 前言 | 第117-118页 |
| 5.2 材料与方法 | 第118-133页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第118页 |
| 5.2.2 高/低亚油酸红花材料中CtFAD2-1基因ORF的扩增 | 第118-119页 |
| 5.2.3 CtFAD2-1基因在高/低亚油酸红花材料种子不同发育时期的表达量比较 | 第119页 |
| 5.2.4 CtFAD2-1和CtFAD2-1'的原核表达 | 第119-133页 |
| 第六章 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶家族系统进化与功能分化 | 第133-151页 |
| 6.1 前言 | 第134-135页 |
| 6.2 材料与方法 | 第135页 |
| 6.2.1 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶氨基酸序列的获得 | 第135页 |
| 6.2.2 序列分析 | 第135页 |
| 6.3 结果与分析 | 第135-148页 |
| 6.3.1 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶组氨酸保守区分析 | 第135-140页 |
| 6.3.2 ω-3脂肪酸脱氢酶N-端非保守区序列分析 | 第140-141页 |
| 6.3.3 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶氨基酸序列C-端ER滞留信号 | 第141-142页 |
| 6.3.4 系统进化分析 | 第142-145页 |
| 6.3.5 亚群间的功能分化 | 第145-148页 |
| 6.3.6 功能分化位点 | 第148页 |
| 6.4 讨论 | 第148-151页 |
| 6.4.1 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶氨基酸序列特征 | 第148-149页 |
| 6.4.2 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶基因家族的起源进化 | 第149-150页 |
| 6.4.3 ω-6和ω-3脂肪酸脱氢酶基因的功能分化 | 第150-151页 |
| 参考文献 | 第151-165页 |
| 致谢 | 第165-167页 |
| 在读期间发表和待发表的论文 | 第167页 |
| 在读期间参与编写的教材 | 第167页 |
