| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-44页 |
| 1.1 分子相互作用研究方法概述 | 第12-18页 |
| 1.1.1 研究蛋白质相互作用的传统生物学方法 | 第13-15页 |
| 1.1.2 光谱学方法 | 第15-16页 |
| 1.1.3 流体学方法 | 第16-17页 |
| 1.1.4 量热学方法 | 第17页 |
| 1.1.5 结构学方法 | 第17-18页 |
| 1.2 SPR | 第18-28页 |
| 1.2.1 SPR的原理 | 第18-20页 |
| 1.2.2 SPR仪的类型 | 第20-22页 |
| 1.2.3 双单元差分型SPR仪 | 第22-25页 |
| 1.2.4 数据分析 | 第25-28页 |
| 1.3 荧光光谱法研究分子相互作用 | 第28-32页 |
| 1.3.1 蛋白质的内源荧光 | 第28-29页 |
| 1.3.2 荧光猝灭法热力学分析 | 第29-31页 |
| 1.3.3 热力学参数与分子相互作用分析 | 第31-32页 |
| 1.4 朊蛋白与朊蛋白病 | 第32-38页 |
| 1.4.1 朊蛋白及具生物学功能 | 第32-35页 |
| 1.4.2 朊蛋白病的发病机理 | 第35-36页 |
| 1.4.3 朊蛋白病的治疗 | 第36-38页 |
| 1.5 本论文的立题思想及主要工作 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 第二章 利用SPR、荧光猝灭和电化学方法综合研究阳离子卟啉与BSA的相互作用 | 第44-64页 |
| 2.1 引言 | 第44-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 2.2.1 试剂 | 第45-46页 |
| 2.2.2 金膜的表面修饰及BSA在金膜表面上的固定 | 第46-47页 |
| 2.2.3 SPR结合实验 | 第47-48页 |
| 2.2.4 荧光猝灭实验 | 第48页 |
| 2.2.5 循环伏安实验 | 第48页 |
| 2.3 实验结果及讨论 | 第48-60页 |
| 2.3.1 SPR研究卟啉与BSA的相互作用 | 第48-51页 |
| 2.3.2 荧光猝灭法研究卟啉与BSA的相互作用 | 第51-54页 |
| 2.3.3 循环伏安法研究卟啉与BSA的相互作用 | 第54-57页 |
| 2.3.4 三种研究方法的比较 | 第57-60页 |
| 2.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第三章 利用SPR、荧光猝灭、RLS和CD等方法研究阳离子卟啉与重组人朊蛋白rPrPC(23-231)的相互作用 | 第64-95页 |
| 3.1 引言 | 第64-66页 |
| 3.2 实验方法 | 第66-71页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第66页 |
| 3.2.2 重组人朊蛋白rPrP~C(23-231)的原核表达及其分离纯化 | 第66-68页 |
| 3.2.3 金膜的表面修饰及rPrP~C(23-231)在金膜表面上的固定 | 第68-69页 |
| 3.2.4 rPrP~C(23-231)在金膜表面上固定的SPR角及AFM表征 | 第69页 |
| 3.2.5 SPR结合实验 | 第69页 |
| 3.2.6 荧光猝灭实验 | 第69-70页 |
| 3.2.7 共振光散射实验 | 第70页 |
| 3.2.8 圆二色色谱及热稳定性实验 | 第70页 |
| 3.2.9 分子模拟 | 第70-71页 |
| 3.3 实验结果及讨论 | 第71-89页 |
| 3.3.1 rPrP~C(23-231)的纯度分析 | 第71页 |
| 3.3.2 rPrP~C(23-231)在线固定及其固定后的表征 | 第71-75页 |
| 3.3.3 SPR研究卟啉与rPrP~C的相互作用 | 第75-79页 |
| 3.3.4 荧光猝灭法研究卟啉与rPrP~C的相互作用 | 第79-84页 |
| 3.3.5 共振光散射实验研究卟啉与rPrP~C的相互作用 | 第84-86页 |
| 3.3.6 圆二色色谱实验 | 第86-88页 |
| 3.3.7 分子模拟实验 | 第88-89页 |
| 3.4 讨论 | 第89-91页 |
| 3.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 第四章 利用SPR、荧光光谱法研究不同的金属离子与重组人朊蛋白rPrPC(23-231)的相互作用 | 第95-122页 |
| 4.1 引言 | 第95-96页 |
| 4.2 实验方法 | 第96-98页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第96-97页 |
| 4.2.2 SPR实验 | 第97页 |
| 4.2.3 荧光猝灭实验 | 第97-98页 |
| 4.3 实验结果及讨论 | 第98-117页 |
| 4.3.1 SPR实验 | 第98-107页 |
| 4.3.1.1 Glycine-HCl缓冲液对结合金属离子的洗脱实验 | 第98-99页 |
| 4.3.1.2 不同金属离子与rPrP~C(23-231)相互作用的SPR实验 | 第99-104页 |
| 4.3.1.3 不同浓度Cu~(2+)与rPrP~C(23-231)相互作用的SPR实验 | 第104-107页 |
| 4.3.2 荧光实验 | 第107-117页 |
| 4.3.2.1 pH 4.0时不同金属离子对rPrP~C(23-231)荧光的猝灭作用 | 第107-110页 |
| 4.3.2.2 pH 5.0时不同金属离子对rPrP~C(23-231)荧光的猝灭作用 | 第110-111页 |
| 4.3.2.3 pH 6.0时不同金属离子对rPrP~C(23-231)荧光的猝灭作用 | 第111-117页 |
| 4.4 本章小结 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-122页 |
| 第五章 固定大肠杆菌构建SPR传感器检测T4噬菌体 | 第122-140页 |
| 5.1 引言 | 第122-124页 |
| 5.2 实验方法 | 第124-127页 |
| 5.2.1 试剂 | 第124页 |
| 5.2.2 噬菌体及细菌的制备 | 第124-125页 |
| 5.2.3 大肠杆菌在金膜上的固定 | 第125-126页 |
| 5.2.4 电化学方法对固定大肠杆菌的表征 | 第126页 |
| 5.2.5 荧光显微镜观察对固定大肠杆菌的表征 | 第126页 |
| 5.2.6 SPR检测噬菌体实验 | 第126-127页 |
| 5.3 实验结果及讨论 | 第127-136页 |
| 5.3.1 循环伏安法及交流阻抗法对固定大肠杆菌的表征 | 第127-129页 |
| 5.3.2 荧光显微镜观察对固定大肠杆菌的表征 | 第129页 |
| 5.3.3 大肠杆菌固定过程的SPR响应曲线 | 第129-130页 |
| 5.3.4 大肠杆菌构建的SPR传感器吸附T4噬菌体的SPR响应曲线 | 第130-135页 |
| 5.3.5 流速对噬菌体吸附过程的SPR向应的影响 | 第135-136页 |
| 5.4 本章小结 | 第136-137页 |
| 参考文献 | 第137-140页 |
| 第六章 总结及展望 | 第140-142页 |
| 6.1 工作总结 | 第140-141页 |
| 6.2 工作展望 | 第141-142页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
