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诱导肿瘤来源的多能性干细胞及其功能和机理的研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第9-18页
实验材料第18-33页
实验方法第33-59页
    1 实验流程图第33-34页
    2 肿瘤细胞培养第34-35页
    3 滋养层细胞的培养和丝裂霉素C处理第35-37页
    4 肿瘤来源的诱导多能性干细胞培养第37页
    5 肿瘤细胞药物敏感浓度的确定第37-39页
    6 质粒扩增、提取、纯化第39页
    7 肿瘤细胞中稳定Tet-off系统的建立第39-40页
    8 荧光素酶报告基因检测第40-41页
    9 X-gal染色检测LacZ报告基因活性第41-42页
    10 基因组DNA提取第42页
    11 细胞基因组中PB-TET-MKOS的整合位点分析第42-45页
    12 细胞总RNA的提取第45-46页
    13 半定量RT-PCR第46-47页
    14 实时定量RT-PCR第47-48页
    15 细胞免疫荧光技术检测蛋白表达第48页
    16 Western blotting检测细胞蛋白表达水平第48-51页
    17 重亚硫酸盐测序法检测基因的启动子区域甲基化状态第51-52页
    18 活细胞Hoechst染色实验第52-53页
    19 体外诱导分化实验第53页
    20 畸胎瘤形成实验第53页
    21 体外诱导骨定向分化第53-54页
    22 茜素红染色实验第54页
    23 肿瘤化疗药物敏感性检测(MTT法)第54-55页
    24 流式细胞法检测细胞凋亡第55页
    25 测定细胞生长曲线(MTT法)第55-56页
    26 琼脂克隆形成实验第56-57页
    27 细胞核型分析第57页
    28 肿瘤细胞球(Tumor sphere)形成实验第57页
    29 Transwell侵袭实验第57-58页
    30 流式细胞法检测细胞表达CD133的情况第58页
    31 统计学分析第58-59页
实验结果第59-106页
    第一部分:诱导小鼠黑色素瘤来源的多能性干细胞的研究第59-89页
        1 诱导产生小鼠黑色素瘤来源的iPCCs(B16-iPCCs)第59-64页
        2 B16-iPCCs具有多能性第64-73页
        3 B16-iPCCs与诱导前B16-2B2细胞相比恶性程度增高第73-84页
        4 体外诱导分化后的B16-iPCCs(P-B16-iPCCs)肿瘤的恶性程度降低第84-87页
        5 小结第87-89页
    第二部分 :诱导小鼠胰腺癌来源的多能性干细胞的研究第89-106页
        1 诱导产生小鼠胰腺癌来源的iPCCs(Pan02-iPCCs)第89-91页
        2 Pan02-iPCCs具有多能性第91-94页
        3 肿瘤细胞微环境诱导Pan02-iPCCs发生EMT转化第94-96页
        4 肿瘤细胞微环境诱导后的Pan02-iPCCs高表达Sox2第96-97页
        5 肿瘤细胞微环境诱导后的Pan02-iPCCs恶性程度增加第97-104页
        6 小结第104-106页
讨论第106-114页
参考文献第114-120页
缩略语第120-122页
文献综述第122-141页
    参考文献第134-141页
致谢第141-142页
个人简历第142-143页

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