目录 | 第6-9页 |
致谢 | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第17-34页 |
1.1 铁的吸收 | 第18-20页 |
1.1.1 铁吸收机制-还原机制(机制Ⅰ) | 第18-19页 |
1.1.2 铁吸收机制-螯合机制(机制Ⅱ) | 第19-20页 |
1.2 铁的转运 | 第20-26页 |
1.2.1 铁在木质部中的转运 | 第21-22页 |
1.2.2 铁在韧皮部中的转运 | 第22-24页 |
1.2.3 细胞中的铁转运 | 第24-26页 |
1.2.3.1 线粒体 | 第24页 |
1.2.3.2 叶绿体 | 第24-25页 |
1.2.3.3 液泡 | 第25-26页 |
1.3 铁信号调控 | 第26-30页 |
1.3.1 碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子家族 | 第26页 |
1.3.2 铁信号调控-还原机制 | 第26-28页 |
1.3.3 铁信号调控-螯合机制 | 第28-30页 |
1.4 调控缺铁响应的信号分子 | 第30-33页 |
1.4.1 植物激素乙烯与缺铁信号 | 第30-32页 |
1.4.2 其它参与调控缺铁响应信号的激素与小分子物质 | 第32-33页 |
1.4.2.1 生长素和一氧化氮(NO) | 第32页 |
1.4.2.2 细胞分裂素和茉莉酸 | 第32-33页 |
1.5 本研究的目的意义及主要内容 | 第33-34页 |
第二章 材料方法 | 第34-45页 |
2.1 实验材料 | 第34页 |
2.1.1 OsbHLH133转录因子的功能研究 | 第34页 |
2.1.2 缺铁诱导乙烯合成分子机理的研究 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-45页 |
2.2.1 植物生长条件 | 第34-36页 |
2.2.1.1 水稻的生长条件 | 第34-35页 |
2.2.1.2 拟南芥的生长条件 | 第35-36页 |
2.2.2 表达载体的构建和突变体的鉴定 | 第36-38页 |
2.2.3 农杆菌介导的水稻转化 | 第38页 |
2.2.4 进化树分析 | 第38-39页 |
2.2.4.1 bHLH蛋白的进化树分析 | 第38-39页 |
2.2.4.2 水稻、拟南芥、玉米ACS蛋白的进化树分析 | 第39页 |
2.2.5 OsbHLH133的亚细胞定位 | 第39页 |
2.2.6 GUS(β-glucuronidase)染色及切片分析 | 第39-40页 |
2.2.7 SPAD值测定 | 第40页 |
2.2.8 水稻木质部液收集及样品处理 | 第40页 |
2.2.9 金属元素含量测定 | 第40页 |
2.2.10 拟南芥乙烯含量测定 | 第40-41页 |
2.2.11 三价铁还原酶(Ferric-chelate Reductase)活性测定 | 第41页 |
2.2.12 基因表达分析 | 第41-45页 |
2.2.12.1 RNA的提取和纯化 | 第41-42页 |
2.2.12.2 cDNA第一链的合成 | 第42-43页 |
2.2.12.3 芯片样品的制备和杂交 | 第43页 |
2.2.12.4 芯片数据分析 | 第43页 |
2.2.12.5 定量RT-PCR分析 | 第43-45页 |
第三章 缺铁响应转录因子OsbHLH133的功能研究 | 第45-68页 |
3.1 结果与分析 | 第45-64页 |
3.1.1 OsbHLH133的序列分析 | 第45-47页 |
3.1.2 OsbHLH133的亚细胞定位 | 第47页 |
3.1.3 OsbHLH133的表达模式 | 第47-51页 |
3.1.3.1 OsbHLH133受缺铁诱导 | 第47-49页 |
3.1.3.2 GUS表达部位分析OsbHLH133的组织表达情况 | 第49-51页 |
3.1.4 突变体及超表达材料的鉴定 | 第51-53页 |
3.1.5 突变体和超表达株系的生长状况 | 第53-56页 |
3.1.6 铁含量的测定 | 第56-58页 |
3.1.7 基因表达分析 | 第58-64页 |
3.1.7.1 基因芯片分析突变体和野生型的基因表达 | 第58-63页 |
3.1.7.2 定量RT-PCR分析超表达和突变体植株中缺铁响应基因的表达 | 第63-64页 |
3.2 讨论 | 第64-68页 |
第四章 缺铁诱导乙烯合成分子机理的研究 | 第68-79页 |
4.1 结果与分析 | 第68-76页 |
4.1.1 拟南芥、水稻和玉米ACS蛋白的结构及进化分析 | 第68-70页 |
4.1.2 拟南芥ACS基因、MPK基因在供缺铁条件下的表达模式 | 第70-72页 |
4.1.3 拟南芥野生型和突变体植株乙烯含量的测定 | 第72-74页 |
4.1.4 拟南芥acs2/6,acs1/2/4/5/6/7/9/11突变体的生理数据 | 第74-75页 |
4.1.5 缺铁响应基因在acs2/6和acs1/2/4/5/6/7/9/11突变体中的表达 | 第75-76页 |
4.2 讨论 | 第76-79页 |
第五章 结论与展望 | 第79-81页 |
5.1 OsbHLH133参与调控铁在水稻地下和地上部分的分布 | 第79-80页 |
5.2 缺铁诱导乙烯合成分子机理的研究 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第91页 |