表1 英汉缩略词表 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 前言 | 第9-11页 |
第二章 材料和方法 | 第11-27页 |
1 主要实验材料﹑仪器及试剂配制 | 第11-14页 |
1.1 主要试剂 | 第11页 |
1.2 实验动物 | 第11页 |
1.3 载体和菌株 | 第11页 |
1.4 主要实验仪器 | 第11-12页 |
1.5 主要溶液试剂的配制 | 第12-14页 |
2 方法 | 第14-27页 |
2.1 BC022687(N 端)原核质粒的构建,表达及蛋白纯化 | 第14-21页 |
2.1.1 睾丸组织总 RNA 的提取及 RT-PCR | 第14-15页 |
2.1.2 BC022687 基因 N 端编码序列的扩增 | 第15-16页 |
2.1.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第16-17页 |
2.1.4 PCR 产物纯化 | 第17页 |
2.1.5 TA 克隆 | 第17页 |
2.1.6 TA 克隆连接产物的转化与筛选 | 第17-18页 |
2.1.7 质粒的提取与纯化 | 第18页 |
2.1.8 重组质粒进行进行鉴定 | 第18页 |
2.1.9 原核重组质粒 BC022687(N 端)/pET-28a(+)的构建 | 第18-19页 |
2.1.10 BC022687(N 端)/pET-28a(+)重组质粒的鉴定 | 第19-20页 |
2.1.11 重组质粒诱导表达后 Western blot 进一步验证 | 第20-21页 |
2.1.12 6×His Tag 蛋白亲和纯化 | 第21页 |
2.2 BC022687(全长)真核质粒的构建,转染表达及定位 | 第21-27页 |
2.2.1 BC022687 真核质粒的构建 | 第21-25页 |
2.2.2 BC022687(全长)/pEGFP-C1 重组质粒转染哺乳细胞 | 第25-27页 |
第三章 结果 | 第27-39页 |
1 提总 RNA 的结果 | 第27页 |
2 BC022687(N 端)原核重组质粒的构建,表达及蛋白纯化结果 | 第27-33页 |
2.1 BC022687(N 端)片段 PCR 结果 | 第27-28页 |
2.2 BC022687(N 端)/pCR 2.1TA vector 重组质粒双酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
2.3 BC022687(N 端)/pCR 2.1TA vector 克隆重组质粒测序结果 | 第29页 |
2.4 BC022687(N 端)/pET-28a(+)原核质粒的双酶切鉴定 | 第29-30页 |
2.5 BC022687(N 端)/pET-28a(+)原核质粒的测序报告 | 第30页 |
2.6 蛋白含量测定结果 | 第30-31页 |
2.7 SDS-PAGE 分析 | 第31-32页 |
2.8 BC022687(N 端)/pET-28a(+)重组质粒表达的融合蛋白 Western blot 分析结果 | 第32页 |
2.9 原核融合蛋白的纯化结果 | 第32-33页 |
3. BC022687(全长)真核质粒的构建,表达及蛋白定位结果 | 第33-39页 |
3.1 BC022687(全长)PCR 结果 | 第33-34页 |
3.2 BC022687(全长)/pCR 2.1TA vector 重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第34页 |
3.3 BC022687 (全长)/pCR 2.1 TA vector 重组质粒的测序结果 | 第34-35页 |
3.4 BC022687 (全长)/pEFGP-C1 重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第35页 |
3.5 BC022687(全长)/pEFGP-C1 重组质粒的测序结果 | 第35-36页 |
3.6 BC022687(全长)/pEFGP-C1 重组质粒转染 CHO 细胞后的 Western Blot 结果 | 第36-37页 |
3.7 BC022687(全长)/GFP 融合蛋白在细胞内的定位 | 第37-39页 |
第四章 讨论 | 第39-40页 |
第五章 本次研究的不足 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
综述 | 第44-48页 |
参考文献 | 第47-48页 |
硕士期间科研工作 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |