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BC022687基因原核及真核重组质粒的构建及表达

表1 英汉缩略词表第4-5页
摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 前言第9-11页
第二章 材料和方法第11-27页
    1 主要实验材料﹑仪器及试剂配制第11-14页
        1.1 主要试剂第11页
        1.2 实验动物第11页
        1.3 载体和菌株第11页
        1.4 主要实验仪器第11-12页
        1.5 主要溶液试剂的配制第12-14页
    2 方法第14-27页
        2.1 BC022687(N 端)原核质粒的构建,表达及蛋白纯化第14-21页
            2.1.1 睾丸组织总 RNA 的提取及 RT-PCR第14-15页
            2.1.2 BC022687 基因 N 端编码序列的扩增第15-16页
            2.1.3 琼脂糖凝胶电泳第16-17页
            2.1.4 PCR 产物纯化第17页
            2.1.5 TA 克隆第17页
            2.1.6 TA 克隆连接产物的转化与筛选第17-18页
            2.1.7 质粒的提取与纯化第18页
            2.1.8 重组质粒进行进行鉴定第18页
            2.1.9 原核重组质粒 BC022687(N 端)/pET-28a(+)的构建第18-19页
            2.1.10 BC022687(N 端)/pET-28a(+)重组质粒的鉴定第19-20页
            2.1.11 重组质粒诱导表达后 Western blot 进一步验证第20-21页
            2.1.12 6×His Tag 蛋白亲和纯化第21页
        2.2 BC022687(全长)真核质粒的构建,转染表达及定位第21-27页
            2.2.1 BC022687 真核质粒的构建第21-25页
            2.2.2 BC022687(全长)/pEGFP-C1 重组质粒转染哺乳细胞第25-27页
第三章 结果第27-39页
    1 提总 RNA 的结果第27页
    2 BC022687(N 端)原核重组质粒的构建,表达及蛋白纯化结果第27-33页
        2.1 BC022687(N 端)片段 PCR 结果第27-28页
        2.2 BC022687(N 端)/pCR 2.1TA vector 重组质粒双酶切鉴定结果第28-29页
        2.3 BC022687(N 端)/pCR 2.1TA vector 克隆重组质粒测序结果第29页
        2.4 BC022687(N 端)/pET-28a(+)原核质粒的双酶切鉴定第29-30页
        2.5 BC022687(N 端)/pET-28a(+)原核质粒的测序报告第30页
        2.6 蛋白含量测定结果第30-31页
        2.7 SDS-PAGE 分析第31-32页
        2.8 BC022687(N 端)/pET-28a(+)重组质粒表达的融合蛋白 Western blot 分析结果第32页
        2.9 原核融合蛋白的纯化结果第32-33页
    3. BC022687(全长)真核质粒的构建,表达及蛋白定位结果第33-39页
        3.1 BC022687(全长)PCR 结果第33-34页
        3.2 BC022687(全长)/pCR 2.1TA vector 重组质粒的双酶切鉴定结果第34页
        3.3 BC022687 (全长)/pCR 2.1 TA vector 重组质粒的测序结果第34-35页
        3.4 BC022687 (全长)/pEFGP-C1 重组质粒的双酶切鉴定结果第35页
        3.5 BC022687(全长)/pEFGP-C1 重组质粒的测序结果第35-36页
        3.6 BC022687(全长)/pEFGP-C1 重组质粒转染 CHO 细胞后的 Western Blot 结果第36-37页
        3.7 BC022687(全长)/GFP 融合蛋白在细胞内的定位第37-39页
第四章 讨论第39-40页
第五章 本次研究的不足第40-41页
参考文献第41-44页
综述第44-48页
    参考文献第47-48页
硕士期间科研工作第48-49页
致谢第49页

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