| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 磺胺类药物的理化性质 | 第14-15页 |
| 1.1.2 磺胺类药物的作用机理 | 第15页 |
| 1.2 磺胺二甲嘧啶残留现状及危害 | 第15-16页 |
| 1.2.1 磺胺二甲嘧啶在机体内的代谢 | 第15-16页 |
| 1.2.2 磺胺二甲嘧啶的主要危害 | 第16页 |
| 1.3 磺胺二甲嘧啶残留检测方法研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 微生物学方法 | 第16页 |
| 1.3.2 高效液相色谱法（High performance liquid chromatography） | 第16-17页 |
| 1.3.3 气相色谱法(Gas chromatography，GC) | 第17页 |
| 1.3.4 薄层色谱法(Thin layer chromatography，TLC) | 第17页 |
| 1.3.5 毛细管电泳法（Capillary electrophoresis based immunoassay,CEIA） | 第17-18页 |
| 1.3.6 生物传感器 | 第18页 |
| 1.3.7 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第18页 |
| 1.3.8 胶体金免疫标记技术（CGIA） | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 磺胺二甲嘧啶人工完全抗原的合成与鉴定 | 第20-26页 |
| 2.1 试剂 | 第20页 |
| 2.2 设备 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.3.1 重氮化法合成免疫原 SM2-BSA 和检测原 SM2-OVA | 第20-21页 |
| 2.3.2 人工合成抗原的鉴定 | 第21页 |
| 2.4 结果分析 | 第21-24页 |
| 2.4.1 合成抗原蛋白浓度的测定结果 | 第21-22页 |
| 2.4.2 紫外光谱扫描结果 | 第22-24页 |
| 2.4.3 SDS-PAGE 鉴定结果 | 第24页 |
| 2.4.4 红外光谱扫描鉴定 | 第24页 |
| 2.5 小结 | 第24-26页 |
| 3 磺胺二甲嘧啶单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第26-31页 |
| 3.1 试剂 | 第26页 |
| 3.2 仪器设备 | 第26页 |
| 3.3 动物免疫 | 第26-27页 |
| 3.4 血清效价及抑制的测定 | 第27-28页 |
| 3.4.1 常规间接 ELISA 法测定血清效价 | 第27页 |
| 3.4.2 直接阻断 ELISA（ciELISA）测定抑制率 | 第27-28页 |
| 3.5 细胞融合 | 第28-30页 |
| 3.5.1 免疫细胞悬液的制备 | 第28页 |
| 3.5.2 饲养细胞的制备 | 第28页 |
| 3.5.3 骨髓瘤细胞悬液制备 | 第28-29页 |
| 3.5.4 细胞融合 | 第29页 |
| 3.5.5 融合细胞的选择性培养 | 第29页 |
| 3.5.6 阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第29页 |
| 3.5.7 单克隆抗体的大量制备 | 第29页 |
| 3.5.8 阳性单克隆杂交瘤细胞冻存与复苏 | 第29-30页 |
| 3.6 结果分析 | 第30-31页 |
| 3.6.1 小鼠的血清效价及抑制率的测定 | 第30页 |
| 3.6.2 杂交瘤细胞株的筛选 | 第30-31页 |
| 4 磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及其特性鉴定 | 第31-35页 |
| 4.1 试剂 | 第31页 |
| 4.2 仪器 | 第31页 |
| 4.3 单克隆抗体的纯化 | 第31页 |
| 4.4 单克隆抗体的鉴定 | 第31-32页 |
| 4.4.1 4H4 和 3A12 两株抗体效价测定 | 第31页 |
| 4.4.2 抗体亚型测定 | 第31页 |
| 4.4.3 抗体亲和力测定 | 第31-32页 |
| 4.4.4 抗体的特异性测定 | 第32页 |
| 4.5 结果与分析 | 第32-35页 |
| 4.5.1 SM2 单抗的效价测定 | 第32-33页 |
| 4.5.2 SM2 抗体的敏感性测定结果 | 第33页 |
| 4.5.3 SM2 单抗的免疫球蛋白亚型测定 | 第33页 |
| 4.5.4 SM2 单抗的亲和常数测定 | 第33页 |
| 4.5.5 SM2 单抗的特异性测定 | 第33-35页 |
| 5 磺胺二甲嘧啶免疫检测技术的初步建立 | 第35-39页 |
| 5.1 直接阻断 ELISA（ciELSA）实验的优化 | 第35-36页 |
| 5.1.1 包被抗原浓度和抗体工作浓度的确定 | 第35页 |
| 5.1.2 最佳竞争体系的优化 | 第35页 |
| 5.1.3 最佳竞争反应时间的确定 | 第35页 |
| 5.1.4 体系各组分最佳竞争反应体积的确定 | 第35-36页 |
| 5.2 标准曲线的绘制 | 第36页 |
| 5.3 结果与分析 | 第36-39页 |
| 5.3.1 包被抗原浓度和抗体工作浓度的确定 | 第36页 |
| 5.3.2 最佳竞争体系 | 第36-37页 |
| 5.3.3 最佳竞争反应时间 | 第37-38页 |
| 5.3.4 体系各组分最佳竞争反应体积的确定 | 第38页 |
| 5.3.5 标准曲线绘制 | 第38-39页 |
| 6 磺胺二甲嘧啶酶联免疫试剂盒的研制 | 第39-46页 |
| 6.1 概要 | 第39页 |
| 6.2 检测原理 | 第39页 |
| 6.3 试剂盒组成 | 第39-40页 |
| 6.4 样品处理 | 第40页 |
| 6.5 SM2 试剂盒的性能测定 | 第40-41页 |
| 6.5.1 灵敏度测定 | 第40页 |
| 6.5.2 添加回收率和变异系数的测定 | 第40-41页 |
| 6.5.3 试剂盒的保存期试验 | 第41页 |
| 6.6 ciELISA 法与仪器方法的比较 | 第41页 |
| 6.7 与国外的 ELISA 试剂盒进行对比试验 | 第41页 |
| 6.8 结果与分析 | 第41-46页 |
| 6.8.1 灵敏度测定结果 | 第41页 |
| 6.8.2 添加回收率和批内、批间变异系数的测定 | 第41-42页 |
| 6.8.3 试剂盒的保存期试验 | 第42-43页 |
| 6.8.4 与仪器方法的对比试验 | 第43-44页 |
| 6.8.5 与国外试剂盒的对比试验 | 第44-46页 |
| 7 讨论 | 第46-48页 |
| 7.1 磺胺二甲嘧啶免疫抗原和检测抗原的合成 | 第46页 |
| 7.2 单克隆抗体的制备 | 第46页 |
| 7.3 样品的处理方法 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 后记 | 第52-53页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第53页 |
