摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1 鹰嘴豆的研究概况 | 第13-18页 |
1.1 鹰嘴豆简介、分类及种植分布 | 第13-15页 |
1.2 鹰嘴豆的营养成分 | 第15-17页 |
1.3 鹰嘴豆的加工与应用 | 第17-18页 |
2 α-淀粉酶抑制剂的研究概况 | 第18-24页 |
2.1 α-淀粉酶抑制剂研究的背景和意义 | 第18-19页 |
2.2 α-淀粉酶抑制剂的资源分布及类型 | 第19页 |
2.3 α-淀粉酶抑制剂国内外研究进展 | 第19-20页 |
2.4 蛋白类α-淀粉酶抑制剂的类型及作用原理 | 第20-23页 |
2.5 α-淀粉酶抑制剂的应用前景 | 第23-24页 |
3 鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂的研究概况 | 第24-25页 |
4 本研究的目的意义 | 第25-27页 |
第二章 鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂CL-AI蛋白的原核表达及纯化 | 第27-45页 |
1 材料与方法 | 第27-38页 |
1.1 实验材料 | 第27页 |
1.2 菌株、质粒载体、试剂 | 第27-28页 |
1.3 主要试剂配制 | 第28-30页 |
1.4 实验方法 | 第30-38页 |
2 实验结果 | 第38-44页 |
2.1 CL-AI基因及其亚基CI-AI-α、CI-AI-β的亚克隆 | 第38-39页 |
2.2 CL-AI及其CI-AI-α、CI-AI-β原核表达载体的构建 | 第39页 |
2.3 原核表达产物的检测 | 第39-40页 |
2.4 原核表达条件的优化 | 第40-42页 |
2.5 原核表达蛋白的纯化及Western blot检测 | 第42-43页 |
2.6 凝胶过滤层析纯化 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
第三章 鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂CL-AI-β蛋白的可溶性原核表达探索 | 第45-55页 |
1 材料与方法 | 第45-49页 |
1.1 实验材料 | 第45-46页 |
1.2 引物合成与序列 | 第46页 |
1.3 实验方法 | 第46-49页 |
2 结果分析 | 第49-52页 |
2.1 CL-AI-β基因原核表达载体的构建 | 第49-50页 |
2.2 CL-AI-β蛋白的原核表达形式鉴定 | 第50-51页 |
2.3 CL-AI-β原核表达蛋白的纯化及Western Blot检测 | 第51页 |
2.4 原核表达蛋白α-淀粉酶抑制活性的测定 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
第四章 CL-AI重组蛋白生物学特性的研究 | 第55-75页 |
1 材料与方法 | 第55-64页 |
1.1 实验材料 | 第55页 |
1.2 主要试剂 | 第55页 |
1.3 主要仪器 | 第55-56页 |
1.4 引物设计与序列 | 第56页 |
1.5 实验方法 | 第56-64页 |
2 结果分析 | 第64-74页 |
2.1 鹰嘴豆α-淀粉酶AMY1基因的分离、原核表达及纯化 | 第64-67页 |
2.2 鹰嘴豆AMY1蛋白的α-淀粉酶抑制活性的研究 | 第67页 |
2.3 CI-AL-α蛋白的α-葡萄糖苷酶、β-淀粉酶抑制活性的研究 | 第67-69页 |
2.4 CI-AL基因点突变原核表达载体的构建及融合蛋白的表达 | 第69-70页 |
2.5 CI-AL基因点突变原核表达蛋白的纯化及Western Blot检测 | 第70-71页 |
2.6 CI-AL基因点突变原核表达蛋白的α-淀粉酶抑制活性的研究 | 第71-72页 |
2.7 CL-AI蛋白对小麦、玉米、水稻发芽的影响 | 第72-74页 |
3 讨论 | 第74-75页 |
第五章 CL-AI蛋白的初步晶体生长及筛选 | 第75-83页 |
1 材料与方法 | 第75-79页 |
1.1 实验材料 | 第75页 |
1.2 主要试剂 | 第75-76页 |
1.3 主要耗材及仪器 | 第76页 |
1.4 实验方法 | 第76-79页 |
2 结果与分析 | 第79-81页 |
2.1 CL-AI蛋白结晶条件初筛 | 第79-80页 |
2.2 CL-AI蛋白结晶条件的优化 | 第80-81页 |
2.3 X-Ray衍射收集晶体数据 | 第81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
全文总结 | 第83-85页 |
全文创新点 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-97页 |
附录 | 第97-99页 |
在读期间发表的论文 | 第99-101页 |
致谢 | 第101页 |