| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一章 牛病毒性腹泻病研究进展 | 第13-26页 |
| ·病原学 | 第13-14页 |
| ·分子生物学特征 | 第14-17页 |
| ·基因组结构 | 第14-15页 |
| ·编码的蛋白 | 第15-17页 |
| ·BVDV 流行病学研究进展 | 第17-20页 |
| ·传染源 | 第17-18页 |
| ·传播途径 | 第18页 |
| ·易感动物 | 第18-19页 |
| ·BVD 流行的原因分析 | 第19-20页 |
| ·试验室诊断技术研究进展 | 第20-23页 |
| ·血清学诊断方法 | 第20页 |
| ·免疫学诊断方法 | 第20-22页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第22-23页 |
| ·BVD 防治研究进展 | 第23-25页 |
| ·免疫预防 | 第23-24页 |
| ·药物防治 | 第24-25页 |
| ·其他防治措施 | 第25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 试验研究 | 第26-46页 |
| 第二章 BVDV RT-PCR 检测方法的建立 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·毒株 | 第26-27页 |
| ·样品来源 | 第27页 |
| ·所需的主要试剂 | 第27页 |
| ·所需主要仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·引物设计与合成 | 第27-28页 |
| ·样品总RNA 的提取 | 第28页 |
| ·RT-PCR 扩增及鉴定 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增产物的凝胶电泳 | 第29页 |
| ·RT-PCR 检测方法验证 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·RT-PCR 扩增及鉴定 | 第30页 |
| ·RT-PCR 特异性试验 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR 敏感性试验 | 第31页 |
| ·RT-PCR 重复性试验 | 第31页 |
| ·RT-PCR 应用性检测 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 BVDV 病毒的分离及鉴定 | 第33-37页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·细胞及组织样品 | 第33页 |
| ·细胞培养所需主要试剂 | 第33页 |
| ·所需主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·细胞培养 | 第34页 |
| ·病料的处理 | 第34页 |
| ·接种病毒 | 第34-35页 |
| ·细胞培养及病毒增殖结果 | 第35-36页 |
| ·细胞培养物病变结果 | 第35页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第四章 BVDV 分离株5'-UTR 基因的克隆及遗传变异分析 | 第37-46页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·所需主要试剂 | 第37页 |
| ·所需主要仪器 | 第37-38页 |
| ·主要溶液配方 | 第38页 |
| ·分析软件 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-42页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第38-39页 |
| ·重组质粒PGEM-Teasy/5'-UTR 的构建 | 第39页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| ·连接产物的转化 | 第40页 |
| ·重组子的筛选及质粒的提取 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| ·克隆片段的测序及同源性分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-44页 |
| ·重组质粒PGEM-Teasy/5'-UTR 的酶切鉴定及PCR 鉴定 | 第42-43页 |
| ·扩增片段的序列测定及同源性分析结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 英文缩略词及中英文对照 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
