| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 1. 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 石斛简介 | 第10页 |
| 1.2 铁皮石斛多糖研究现状 | 第10-12页 |
| 1.2.1 铁皮石斛多糖的提取工艺 | 第11页 |
| 1.2.2 铁皮石斛多糖的组分及结构分析 | 第11-12页 |
| 1.2.3 铁皮石斛多糖的药理作用 | 第12页 |
| 1.3 模式生物秀丽隐杆线虫 | 第12-16页 |
| 1.3.1 秀丽隐杆线虫的生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.3.2 秀丽隐杆线虫的生命周期 | 第14-15页 |
| 1.3.3 秀丽隐杆线虫作为模式生物优势及特点 | 第15页 |
| 1.3.4 秀丽隐杆线虫胰岛素和胰岛素样信号通路 | 第15-16页 |
| 1.4 衰老与衰老学说 | 第16-17页 |
| 1.4.1 自由基损伤学说 | 第16页 |
| 1.4.2 免疫学说 | 第16-17页 |
| 1.4.3 端粒学说 | 第17页 |
| 1.4.4 热量限制学说 | 第17页 |
| 1.5 研究目的、意义和技术路线 | 第17-19页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第18-19页 |
| 2. 铁皮石斛多糖的提取 | 第19-22页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器与耗材 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 铁皮石斛多糖提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 标准曲线的绘制 | 第20页 |
| 2.2.3 铁皮石斛多糖的得率及含量测定 | 第20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-21页 |
| 2.3.1 标准曲线的绘制 | 第20-21页 |
| 2.3.2 铁皮石斛多糖得率及含量的计算 | 第21页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第21-22页 |
| 3. 铁皮石斛多糖持续饲喂秀线虫的寿命实验 | 第22-30页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 实验仪器与耗材 | 第23-24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 3.2.1 秀丽隐杆线虫食物大肠杆菌的制备 | 第24页 |
| 3.2.2 秀丽隐杆线虫的培养 | 第24页 |
| 3.2.3 秀丽隐杆线虫的传代 | 第24-25页 |
| 3.2.4 秀丽隐杆线虫的同步化 | 第25-26页 |
| 3.2.5 秀丽隐杆线虫的保种与冻存 | 第26页 |
| 3.2.6 秀丽隐杆线虫的除菌 | 第26页 |
| 3.2.7 秀丽隐杆线虫的寿命实验 | 第26-27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-28页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第28-30页 |
| 4. 铁皮石斛多糖持续饲喂线虫的耐受性实验及健康寿命 | 第30-42页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第30页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第30页 |
| 4.1.3 实验仪器与耗材 | 第30页 |
| 4.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 4.2.1 秀丽隐杆线虫的处理与培养 | 第31页 |
| 4.2.2 秀丽隐杆线虫的热应激实验 | 第31页 |
| 4.2.3 秀丽隐杆线虫的氧化应激实验 | 第31-32页 |
| 4.2.4 秀丽隐杆线虫的健康寿命实验 | 第32页 |
| 4.3 结果与分析 | 第32-40页 |
| 4.3.1 秀丽隐杆线虫的热应激实验结果 | 第32-33页 |
| 4.3.2 秀丽隐杆线虫的氧化应激实验结果 | 第33-35页 |
| 4.3.3 秀丽隐杆线虫的健康寿命实验结果 | 第35-40页 |
| 4.3.3.1 秀丽隐杆线虫的寿命实验 | 第35页 |
| 4.3.3.2 秀丽隐杆线虫的耐受性实验 | 第35-40页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第40-42页 |
| 5. 铁皮石斛多糖持续饲喂DAF-2及DAF-16线虫品系的寿命机制的研究 | 第42-51页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第42页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第42页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 5.1.3 实验仪器与耗材 | 第42页 |
| 5.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 5.2.1 线虫的培养与同步化 | 第42-43页 |
| 5.2.2 三种品系线虫的寿命实验 | 第43页 |
| 5.2.3 三种品系线虫的耐受性实验 | 第43页 |
| 5.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 5.3.1 三种品系线虫的寿命实验结果 | 第43-45页 |
| 5.3.2 三种品系线虫的热应激实验结果 | 第45-47页 |
| 5.3.3 三种品系线虫的氧化应激实验结果 | 第47-49页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 6. DAF-16的亚细胞定位 | 第51-62页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第51页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第51页 |
| 6.1.3 实验仪器与耗材 | 第51页 |
| 6.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 6.2.1 线虫的培养 | 第51-52页 |
| 6.2.2 TJ365线虫品系共聚焦显微镜的制片观察 | 第52页 |
| 6.2.3 TJ365线虫品系DAF-16荧光定位分析 | 第52页 |
| 6.3 结果与分析 | 第52-60页 |
| 6.3.1 TJ365线虫品系共聚焦显微镜的制片观察 | 第52-53页 |
| 6.3.2 TJ365线虫品系DAF-16：：GFP荧光亚细胞定位定位分析 | 第53-59页 |
| 6.3.3 TJ365线虫品系DAF-16：：GFP荧光半定量分析 | 第59-60页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 7. 实时荧光定量PCR | 第62-67页 |
| 7.1 实验材料与仪器 | 第62页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 7.1.2 实验试剂 | 第62页 |
| 7.1.3 实验仪器与耗材 | 第62页 |
| 7.2 实验方法 | 第62-65页 |
| 7.2.1 线虫的准备和引物设计合成 | 第62-63页 |
| 7.2.2 线虫RNA的提取 | 第63页 |
| 7.2.3 去除基因组DNA反应 | 第63-64页 |
| 7.2.4 SYBR Green qPCR法 | 第64页 |
| 7.2.5 Real Time PCR | 第64-65页 |
| 7.3 结果与分析 | 第65-66页 |
| 7.4 小结与讨论 | 第66-67页 |
| 8. 结论与展望 | 第67-69页 |
| 8.1 结论 | 第67-68页 |
| 8.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 个人简介 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-75页 |
| 获得成果目录 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
