| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 细胞株来源 | 第13页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第14-15页 |
| 2.2 实验器材、试剂和溶液的准备 | 第15-19页 |
| 2.2.1 细胞培养用品的处理 | 第15-16页 |
| 2.2.2 Ham's F-12K完全培养基的配制 | 第16页 |
| 2.2.3 LPS溶液的配置 | 第16页 |
| 2.2.4 容器去核酶处理 | 第16页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶配置 | 第16-17页 |
| 2.2.6 miR-21 inhibitor、miR-21 negative control溶液配制 | 第17页 |
| 2.2.7 Western Blot相关试剂的配制 | 第17-18页 |
| 2.2.8 免疫荧光相关试剂配制 | 第18页 |
| 2.2.9 ELISA相关试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.3.1 NR8383细胞的复苏、培养、传代和冻存 | 第19-20页 |
| 2.3.2 NR8383细胞的处理与分组 | 第20-21页 |
| 2.3.3 SYBR Green I实时荧光定量PCR检测miR-21、U6、PTEN m RNA及TNF-α m RNA的表达情况。 | 第21-24页 |
| 2.3.4 Western Blot检测p-AKT、PTEN表达的变化 | 第24-27页 |
| 2.3.5 免疫荧光检测LPS刺激后细胞内NF-κB核移位情况 | 第27-28页 |
| 2.3.6 ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α蛋白的含量 | 第28-29页 |
| 2.3.7 统计学处理 | 第29-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-37页 |
| 3.1 优化miR-21 inhibitor转染NR8383细胞的转染效率。 | 第30-33页 |
| 3.1.1 免疫荧光检测miRNA转染NR8383细胞的转染效率 | 第30页 |
| 3.1.2 RT-q PCR检测miR-21inhibitor转染NR8383细胞后miR-21 的表达情况 | 第30-31页 |
| 3.1.3 miR-21 inhibitor对NR8383细胞PTEN表达的影响 | 第31-33页 |
| 3.2 miR-21 对LPS处理的NR8383细胞内TNF-α表达的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.1 RT-q PCR检测细胞内TNF-α m RNA表达水平 | 第34页 |
| 3.2.2 ELISA检测细胞内TNF-α 蛋白的表达水平 | 第34-35页 |
| 3.3 miR-21 对LPS处理的NR8383细胞p-AKT表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 miR-21 对LPS处理的NR8383细胞NF-κB活化情况的影响 | 第36-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 结论与展望 | 第39-40页 |
| 5.1 结论 | 第39页 |
| 5.2 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
| 综述 miR-21在炎症性疾病中的研究进展 | 第46-52页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
