中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 侵袭性曲霉感染概述 | 第11-12页 |
1.2 侵袭性曲霉感染诊断研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 痰培养 | 第12页 |
1.2.2 组织病理学检查 | 第12页 |
1.2.3 影像学检查 | 第12-13页 |
1.2.4 新型检测方法 | 第13-14页 |
1.2.5 血清学检测 | 第14-16页 |
1.3 烟曲霉热休克蛋白Hsp70 | 第16-17页 |
1.4 烟曲霉疏水蛋白Hyp1 | 第17-18页 |
1.5 包涵体 | 第18-20页 |
1.5.1 包涵体的形成机制 | 第18-19页 |
1.5.2 包涵体的优势 | 第19页 |
1.5.3 包涵体的复性 | 第19-20页 |
1.6 研究目的和意义 | 第20页 |
1.7 研究内容 | 第20-21页 |
第二章 烟曲霉Hsp70基因的克隆、表达及表达产物的纯化 | 第21-44页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 PCR引物设计与合成 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.5 主要试剂和培养基的配制 | 第23-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-35页 |
2.2.1 烟曲霉Hsp70基因的扩增 | 第25-27页 |
2.2.2 克隆载体pMD19T- Hsp70的构建 | 第27-30页 |
2.2.3 原核表达载体pET28a- Hsp70的构建 | 第30-31页 |
2.2.4 Hsp70的诱导表达 | 第31页 |
2.2.5 溶解包涵体 | 第31-32页 |
2.2.6 纯化表达蛋白 | 第32-33页 |
2.2.7 纯化蛋白定性定量分析 | 第33-35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-42页 |
2.3.1 烟曲霉Hsp70基因的扩增 | 第35页 |
2.3.2 鉴定pMD19T- Hsp70阳性克隆 | 第35-38页 |
2.3.3 重组质粒pET28a- Hsp70的鉴定 | 第38-40页 |
2.3.4 Hsp70的表达 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第三章 烟曲霉Hyp1基因的克隆表达及表达条件优化 | 第44-51页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-45页 |
3.3 结果 | 第45-50页 |
3.3.1 烟曲霉Hyp1基因的扩增 | 第45-46页 |
3.3.2 鉴定pMD19T- Hyp1阳性克隆 | 第46-47页 |
3.3.3 重组质粒pET28a- Hyp1的鉴定 | 第47-48页 |
3.3.4 Hyp1的表达 | 第48-49页 |
3.3.5 Western-blot分析目的蛋白 | 第49页 |
3.3.6 诱导条件的优化 | 第49-50页 |
3.4 讨论 | 第50-51页 |
第四章 讨论 | 第51-53页 |
第五章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |