中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
中英文对照表 | 第12-14页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
1.1 不可分型流感嗜血杆菌与呼吸道疾病的关系 | 第14-15页 |
1.2 固有免疫 | 第15-17页 |
1.3 不可分型流感嗜血杆菌与固有免疫的研究现况 | 第17-19页 |
第二章 体外实验研究 | 第19-38页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 实验用细胞株 | 第19页 |
2.1.2 实验用细菌菌株 | 第19页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第19-21页 |
2.2.1 主要试剂 | 第19-21页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第21页 |
2.3 主要试剂配制 | 第21-23页 |
2.3.1 巧克力琼脂培养基的配制 | 第21-22页 |
2.3.2 细菌冻存液 | 第22页 |
2.3.3 NTHi增菌液 | 第22页 |
2.3.4 细胞冻存液 | 第22页 |
2.3.5 0.4%台盼蓝染液 | 第22页 |
2.3.6 Western Blot实验材料 | 第22-23页 |
2.3.7 ELISA实验材料 | 第23页 |
2.4 实验方法 | 第23-28页 |
2.4.1 NTHi的分离培养及其生长曲线的绘制 | 第23-24页 |
2.4.2 A549细胞的培养 | 第24页 |
2.4.3 NTHi感染A549细胞模型的建立 | 第24页 |
2.4.4 不同浓度NTHi对细胞活力和凋亡的影响 | 第24-25页 |
2.4.5 WB检测NTHi标准株和临床株感染的A549细胞产生的Caspase-1,IL-1β 和IL-18蛋白表达水平 | 第25-27页 |
2.4.6 ELISA法检测NTHi标准株和临床株作用后细胞因子TNF-α 和IL-6 的蛋白表达水平 | 第27页 |
2.4.7 数据处理和统计学分析 | 第27-28页 |
2.5 实验结果 | 第28-36页 |
2.5.1 NTHi分离培养及细菌生化反应和革兰染色形态鉴定 | 第28-29页 |
2.5.2 NTHi生长曲线的绘制 | 第29页 |
2.5.3 NTHi在对数生长期活菌数与OD600值的函数关系 | 第29-30页 |
2.5.4 NTHi抑制A549细胞存活率 | 第30-31页 |
2.5.5 NTHi诱导A549细胞凋亡 | 第31-32页 |
2.5.6 NTHi感染促进A549细胞表达炎症蛋白Caspase-1,IL1β和IL-18 | 第32-34页 |
2.5.7 NTHi感染促进A549细胞分泌炎性细胞因子TNF-α 和IL-6 | 第34-36页 |
2.6 讨论 | 第36-38页 |
第三章 体内研究 | 第38-51页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 实验动物 | 第38页 |
3.1.2 实验试剂 | 第38-39页 |
3.1.3 实验仪器 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 NTHi引起的呼吸道感染动物模型的建立 | 第39-40页 |
3.2.2 小鼠肺组织和气管HE染色 | 第40页 |
3.2.3 小鼠的气管和肺组织免疫组织化学染色 | 第40-41页 |
3.2.4 RT-PCR检测小鼠肺组织Caspase-1、NF- κB和IL-1βm RNA表达 | 第41-43页 |
3.2.5 统计学分析 | 第43页 |
3.3 实验结果 | 第43-49页 |
3.3.1 小鼠呼吸道感染NTHi | 第43-44页 |
3.3.2 NTHi感染损伤小鼠气管和肺组织 | 第44-46页 |
3.3.3 NTHi感染上调小鼠气管和肺组织中Caspase-1 的表达 | 第46-48页 |
3.3.4 NTHi上调小鼠肺组织中Caspase-1,NF-κB和IL-1βm RNA水平 | 第48-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
第四章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
攻读硕士期间所取得的科研成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |